マクロファージの刺激応答および活性化における分子機序の解析

巨噬细胞刺激反应和激活的分子机制分析

• 批准号: 05770195
• 负责人: 斎藤 慎二
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: Jichi Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-05770195/
• 关键词: LPS; マクロファージ; サイトカイン; リン酸化タンパク質

LPS刺激によるマウスマクロファージからのTNF,IL-1産生でのProtein Kinase阻害剤の影響を検討したところ、強力なPKC阻害剤として知られるStaurosporineが両サイトカインの産生を強く抑制すること、またカルモジュリン阻害剤W-7はIL-1産生のみが抑制され、PKCはTNF,IL-1両者の産生に関与するが、それぞれの産生に到るシグナルには別の経路が働いている可能性が示唆された。しかし、より特異性の高いPKC阻害剤であるCalphostin Cでは、IL-1産生およびIL-1mRNA発現は強く抑制されるもののTNF産生に及ぼす抑制効果は弱く、またTNFmRNA発現は抑制されなかった。これはIL-1産生系はPKC依存性が高いが、それに比してTNF産生系のPKC依存性は極めて低いと考えられる。StaurosporineはPKCの強力な阻害剤であると同時にAkinaseやtyrosine kinaseへの阻害作用も指摘されておりStaurosporineによるTNF産生の抑制効果は種々のkinase阻害作用が複合して現れた可能性がある。一方、LPSにより誘導される65kDaタンバク質のリン酸化はStaurosporine存在下で強く抑制され、H-7,Calphostin C,ならびにW-7により部分的に抑制された。これらの結果は、Staurosporine感受性のカイネースが65kDaタンバク質のリン酸化をひきおこし、さらにこのカイネースの活性がPKCにより調節される可能性を示唆する。IL-1mRNA発現と比較すると65kDaタンバク質リン酸化の阻害剤に対する感受性は低く、LPSシグナル伝達における65kDaタンバク質のIL-1,TNF産生系への関与は明らかでない。Salmonella生菌感染により72kDaおよび85kDaタンパク質をはじめとする数種類のマクロファージ細胞内タンパク質のリン酸化が認められた。これらのタンパク質の意義についてはこれからの検討課題である。残念ながら、本年度はリン酸化タンパク質の精製およびクローニングによる詳細な解析には到らなかった。

Study on the Effects of Protein Kinase Inhibitors on TNF,IL-1 Production in LPS Stimulation, Strong PKC Inhibitors, and Strong Inhibitors of Staurosporine on TNF, IL-1 Production in LPS Stimulation, and Strong Inhibitors of PKC TNF, IL-1 Production in LPS Stimulation The possibility of a change in the system is discussed. Calphostin C, IL-1 production and IL-1mRNA expression are strongly inhibited by highly specific PKC inhibitors, while TNF production and TNF mRNA expression are weakly inhibited by highly specific PKC inhibitors. The PKC dependence of IL-1 production is higher than that of TNF production. Staurosporine is a potent inhibitor of PKC and a potent inhibitor of Akinase and tyrosine kinase. In the presence of Staurosporine, the 65kDa protein was strongly inhibited by LPS, H-7,Calphostin C, and W-7. These results indicate the possibility of regulating the activity of Staurosporine receptor by PKC. IL-1mRNA expression was compared with 65kDa mRNA expression, and the sensitivity to inhibitors of IL-1 and TNF production was lower and lower than LPS expression. Salmonella bacteria infected with 72kDa and 85kDa proteins were identified in several kinds of intracellular proteins. The meaning of this article is to discuss the subject of this article. This year, the quality of the products was refined and analyzed in detail

项目成果

斎藤慎二: "LPS刺激マクロファージのサイトカイン産生系でのPKCの役割" 日本免疫学会総会学術集会記録. 23. 361 (1993)

Shinji Saito：“PKC 在 LPS 刺激的巨噬细胞的细胞因子产生系统中的作用”日本免疫学会年会论文集 23. 361 (1993)。