細菌感染,細菌内毒素によるマクロファージ活性化における分子機序の解析

若干の計画の変更はあったものの多くの成果が得られた。LSP応答の細胞内シグナル伝達経路を明らかにすることを目的に、CD14分子依存性、および非依存性でLSPのシグナル伝達にどの様な違いが見られるかを検討した。CD14陽性細胞(J774.1)は、LPS刺激によりTNF産生、NO産生ともに誘導された。一方、CD14陰性細胞(J7.DEF3)では、Re LPS刺激によるTNF産生は見られるものの、NO産生は著しく低値を示した。この結果よりLPS刺激によるTNF産生とNO産生は、異なるシグナル伝達経路を介すること、即ち、TNF産生は、CD14依存性、非依存性の両経路で誘導され、NO産生は、主としてCD14依存性の経路によって誘導されることが示唆される。J774.1細胞のNO産生が抗CD14抗体で抑制された結果からも裏付けられる。また、LPS刺激によるJ774.1細胞のNO産生は抗IFN-β抗体により抑制さた。しかし、J7.DEF3細胞をINF-β存在下にLPS刺激してもNO産生は認められず、IFN-β産生能の欠如によりNO産生が抑制されるのではない。CD14依存性、非依存性両経路でこの様な活性の解離が明らかになったことから、細胞内での分子動態の差異について解析を進めている。細胞内寄生菌Mycobacterium intracellulare感染によるマクロファージ細胞内リン酸化タンパク質の解析を行った。本菌は遅延発育型の菌であるためか^<32>P標識マクロファージでのリン酸化タンパク質検出法で可能な測定時間内では顕著なリン酸化タンパク質のパターン変化は見られなかった。今後、測定条件の改善が必要である。

若干の計画の変更はあったものの多くの成果が得られた。LSP応答の細胞内シグナル伝達経路を明らかにすることを目的に、CD14分子依存性、および非依存性でLSPのシグナル伝達にどの様な違いが見られるかを検討した。CD14陽性細胞(J774.1)は、LPS刺激によりTNF産生、NO産生ともに誘導された。一方、CD14陰性細胞(J7.DEF3)では、Re LPS刺激によるTNF産生は見られるものの、NO産生は著しく低値を示した。この結果よりLPS刺激によるTNF産生とNO産生は、異なるシグナル伝達経路を介すること、即ち、TNF産生は、CD14依存性、非依存性の両経路で誘導され、NO産生は、主としてCD14依存性の経路によって誘導されることが示唆される。J774.1細胞のNO産生が抗CD14抗体で抑制された結果からも裏付けられる。また、LPS刺激によるJ774.1細胞のNO産生は抗IFN-β抗体により抑制さた。しかし、J7.DEF3細胞をINF-β存在下にLPS刺激してもNO産生は認められず、IFN-β産生能の欠如によりNO産生が抑制されるのではない。CD14依存性、非依存性両経路でこの様な活性の解離が明らかになったことから、細胞内での分子動態の差異について解析を進めている。細胞内寄生菌Mycobacterium intracellulare感染によるマクロファージ細胞内リン酸化タンパク質の解析を行った。本菌は遅延発育型の菌であるためか^<32>P標識マクロファージでのリン酸化タンパク質検出法で可能な測定時間内では顕著なリン酸化タンパク質のパターン変化は見られなかった。今後、測定条件の改善が必要である。