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ヒト内在性レトロウイルスの組み込み酵素に関する研究

人内源性逆转录病毒整合酶的研究

基本信息

批准号：
08770225
负责人：
北村義浩
金额：
$ 0.64万
依托单位：
国立予防衛生研究所
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1996
资助国家：
日本
起止时间：
1996 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08770225/
关键词：
HIV RSV HERV-K 組み込み酵素

项目摘要

レトロウイルスのプロウイルス様の遺伝的因子は、広く脊椎動物のゲノムに存在しており、内在性レトロウイルスと呼ばれている。私は、ヒト内在性レトロウイルスのK-10と呼ばれるクローン(HERVK-10)が、機能を有する組み込み酵素(HERVIN)をコードしている事を明らかにした。HERVINの組み込み活性をin vitroの組み込みアッセイにて調べたところ、HERVK-10のLTRを基質とした場合のみならず、1型ヒト免疫不全ウイルス(HIV-1)やトリ白血病ウイルス(ALV)のLTRを基質とした場合にも、明らかな活性を示した。HERVINがいかなるメカニズムで、三種類ものLTR配列を認識して組み込み反応を遂行するのかを解明するため288アミノ酸残基から成るHERVINのカルボキシル端末の部分の塩基性のアミノ酸(リジン(K)、アルギニン(R))がDNA結合に関与していると推測されたので、これらのアミノ酸のうち265R、268Kを中性のアミノ酸アラニンに替えたようなHEERVIN遺伝子の変異体を作製した。変異体タンパク質は、全て、大腸菌で、マルトース結合タンパク質との融合タンパク質として合成せしめ、さらにアミロースレジンカラムによるアフィニティカラムクロマトグラフィーにて精製した。組み込み活性は、我々が既に開発した、二本鎖オリゴヌクレオチドを用いた、in vitroのアッセイ系を用いて測定した。基質として、HERVK-10,HIV-1,ALVの三種類のLTRを用いたが、二つの変異体は、全く活性を持たなかった。

The factors that influence the development of vertebrate species are: the existence of vertebrate species, the intrinsic nature of vertebrate species, and the development of vertebrate species. The function of HERVK-10 is to make it clear that HERVIN is the most important enzyme in the body. HERVIN group activity in vitro activity in vitro activity in vivo activity in vitro activity in vivo activity in vivo activity HERVIN has three types of LTR alignment: recognition of LTR alignment, identification of LTR alignment. 268K neutral and neutral acid loss, replacement and variation of HEERVIN gene A mixture of different substances, whole substances, coliform substances, mixed substances, synthetic substances, and refined substances. The activity of the enzyme is determined by the reaction of the enzyme to the enzyme. The LTR of matrix, HERVK-10,HIV-1 and ALV is used in the middle, in the middle and in the whole.