ヒト内在性レトロウイルスの探索とそれらの転移活性の解析に関する研究

人内源性逆转录病毒的寻找及其转移活性分析的研究

• 批准号: 05857036
• 负责人: 北村 義浩
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: 国立予防衛生研究所
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-05857036/
• 关键词: レトロウイルス; 組み込み; インテグレース; レトロトランスポゾン; ポリメラーゼ連鎖反応(PCR)

内在性レトロウイルス及びレトロトランスポゾンは、動植物を問わず、種を越えて、生物界に広く分布している。しかし、ヒトでは、これら内在性レトロウイルスは、ほとんど調べられていない。本研究では、レトロウイルスの組み込み酵素(integrase)に注目して、内在性レトロウイルスのクローン化を試みた。 各種のレトロウイルス及びレトロトランスポゾンで非常によく保存されている幾つかのアミノ酸、並びに、その近傍の比較的保存されているアミノ酸配列に相当する12-15ntのオリゴヌクレオチド(guessmer)を作成し、これらのプライマーを用いてのPCR法で、HeLa細胞DNAから、約200-300bpの長さのDNA断片を増幅し、その塩基配列を調べた。調べた約10の断片のうちの2つ(♯60、♯77)は、現在までに知られているレトロウイルスと相同性のあるクローンであった。♯60は、mouse mammary tumor virus(MMTV)、simian D-type retrovirus、Rous sarcoma virusとDNAでそれぞれ62、60、48%の相同性を有し、実際に、タンパク質をコードし得るopen reading frame(ORF)が存在した。この予想されるアミノ酸配列は、MMTVのintegraseのアミノ酸配列と60%が同一であった。♯77は、chimpanzee immunodeficiency virus、sheep retrovirusとDNAでそれぞれ50、46%の相同性を有していたが、実際にタンパク質をコードし得るORFは存在しなかった。現在は、上記の♯60を元にして、HeLa細胞DNAからこの内在性レトロウイルスの全長のクローンのクローン化を試みている。その一方で、HeLe細胞を含め、各種のヒト培養細胞で転写されているかどうかを調べている。

Inherent sex, animal and plant life, species and biological distribution The first is to make sure that you have the right to choose between the two. In this study, we tried to investigate the effect of integrase on the development of endogenous enzymes. All kinds of different kinds of different DNA fragments of about 200-300bp in length were amplified by PCR and the nucleotide sequence of HeLa cells was modulated. About 10 of the pieces were transferred to 2 of the pieces (60, 77), and now it is known that the pieces are identical to each other. 60, mouse mammalian tumor virus(MMTV), simian D-type retrovirus, Rous sarcoma virus and DNA are 62, 60, and 48% identical, and in fact, open reading frames (ORFs) exist. The content of MMTV is 60% of the total content of MMTV. 77, chimpanzee immunodeficiency virus, sheep retrovirus and DNA have 50% and 46% identity, and in fact, the ORF does not exist. Now, we have to record that HeLa cell DNA has been transformed into a full-length gene. The cells were cultured in various ways.