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RAG遺伝子発現制御に関与するシスエレメントの同定

鉴定参与调节 RAG 基因表达的顺式元件

基本信息

批准号：
08770231
负责人：
森啓子
金额：
$ 0.64万
依托单位：
Toyama Medical and Pharmaceutical University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1996
资助国家：
日本
起止时间：
1996 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08770231/
关键词：
遺伝子発現調節 RAG遺伝子

项目摘要

1.ヒトRAG-2遺伝子の構造解析(1) ヒトRAG-2遺伝子については、これまでに翻訳領域を含むエクソンが同定されていたが、cDNAの構造は不明であった。そこでヒトB細胞株Nalm6よりRNAを抽出し、+263〜+282を第一プライマー、+9〜+28を第二プライマーとして5'RACEを行った。その結果、約120bpの第一エクソンと思われる領域を認めた。(2)第一エクソンと思われる領域をプローブとして、ヒトリンパ球ゲノムライブラリーをスクリーニングし、ヒトRAG-2遺伝子を単離した。(3) 単離した遺伝子の塩基配列と、ヒトB細胞株Nalm6ゲノムのサザンマッピングの結果から、ヒトRAG-2遺伝子は2エクソン構造をとること、またヒトRAG-1遺伝子の3'下流にRAG-1遺伝子とは逆向きに存在することが明らかになった。2.ヒトRAG-2遺伝子プロモーター領域の解析(1) 異なる長さのプロモーター領域を含む遺伝子を、ルシフェラーゼをレポーター遺伝子としてもつベクターに挿入した。(2) ヒトB細胞株Nalm6に上記のベクターを導入しルシフェラーゼ活性を測定したところ、-107bpまでの領域が転写に必須であることが確認された。3.今後の計画さらにヒトRAG-1ならびにヒト-2遺伝子の発現制御に関与する領域の同定を試みる。

1. Structural analysis of the ヒトRAG-2 legacy (1)ヒトRAG-2's については, これまでにturned over the field を contain むエクソンが同定されていたが, cDNA's structure is unknown であった.そこでヒトB cell strain Nalm6よりRNAをextractionし, +263~+282をFirstプライマー,+9~+28をSecondプライマーとして5'RACEを行った.そのResult, about 120bpのFirst エクソンと思われる区をcognitionめた. (2) The first エクソンと思われる区をプローブとして, ヒトリンパball ゲノムライブラリーをスクリーニングし, ヒトRAG-2 缝子を単里した. (3)単利した伝子の塩综合と, ヒトB cell line Nalm6ゲノムのサザンマッピングのRESULTS から, ヒトRAG-2 伝子は2エクソンstructuring をとること, またヒトRAG-1 伝子の3' obscene にRAG-1 伝子とは reverse きにexisting することが明らかになった. 2. Analysis of the field of ヒトRAG-2 legacy プロモーター(1) Irrespective of the nature of the fieldラーゼをレポーター伝子としてもつベクターにINSERT した. (2) Determination of the activity of the のベクターを introduced into the Nalm6 cell line of ヒトB cell line Nalm6したところ、-107bpまでの区が転写に must be confirmed by であることが. 3. The plan for the future is RAG-1ならびにヒト-2. The remaining one is the current system of the imperial pass and the same domain is the same as the test.