MHCクラスII分子の細胞内輸送機構の解明

阐明MHC II类分子的细胞内转运机制

• 批准号: 08770240
• 负责人: 千住 覚
• 金额: $ 0.64万
• 依托单位: Kumamoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08770240/
• 关键词: MHC; γ-インターフェロン; 単球; GTP結合蛋白質

研究代表者は、グルタチオンSトランスフェラーゼとIi(MHCクラスII分子結合インバリアント鎖)分子の融合蛋白質を作製し、この融合蛋白質をグルタチオン-アガロースに結合させて、アフィニティ精製カラムを作製した。ヒトBリンパ芽球細胞株(SAVC)より可溶化した蛋白質を,このカラムに通すことによりIi分子に対する結合性を有する蛋白質を精製した。カラムより溶出された分画をSDS-ポリアクリルアミドゲル電気泳動により解析したところ、約20kDのバンドを認めたが、これがIi分子に特異的に結合しているか否かについてはさらに検討を要するものと考えられる。単球系の細胞では、γ-インターフェロンによりMHCクラスII分子、Ii分子などの発現が誘導される。MHCクラスII分子の細胞内輸送に関与する他の分子も同時に発現が誘導されるものと考え、ヒト単球系細胞株(THP-1)においてγ-インターフェロンにより発現が誘導される遺伝子の探索を行った。その結果、新たな遺伝子を発見し、GP-1と命名した。この遺伝子の塩基配列を決定したところ、コードされる蛋白質は、GTP結合蛋白質(G蛋白質)群に共通なアミノ酸配列を有していることが判明した。また、データベース探索により既知の遺伝子との比較を行ったところ、最近、線虫の染色体組み換え部位の近傍に位置する遺伝子として報告されたものに相同性を有していることが判明した。さらに申請者は、マウスのGP-1のcDNAを分離して塩基配列の解析を行い、ヒトとマウスのGP-1がアミノ酸レベルで約95%の相同性を有することを見い出した。ノーザンブロット法を用いてこの遺伝子のマウスの各組織におけるmRNAの発現量を検討した結果、脳、胸腺、肺、腎等において高い発現が認められ、肝、心筋、骨格筋等では比較的低い発現レベルであることが判明した。

The research representative is responsible for the preparation of fusion proteins of MHC II molecules, and the preparation of fusion proteins of MHC II molecules. The soluble protein in the cell line SAVC is purified by molecular binding. The dissolved molecules in the matrix are analyzed by SDS-Policyclic Electrophoresis, and the approximately 20kD molecule is recognized. Whether or not this specific binding of Ii molecules is possible will be discussed. The expression of MHC II and Ii molecules in cells of single cell line is induced by γ-ray. MHC II molecules are involved in intracellular transport and other molecules are simultaneously detected and induced in a single cell line (THP-1). The results of the study, the new results, the GP-1 and the name. The base alignment of these proteins is determined by the protein, GTP binding protein (G protein), and the base alignment of these proteins is determined by the protein. To explore the similarities between known genes and the near position of the genome of the most recent and most recent worm. In addition, the applicant has been able to isolate the cDNA of Mausi's GP-1 and analyze its base sequence, and has found that Mausi's GP-1 is approximately 95% identical to Mausi's GP-1. The expression of mRNA in various tissues was investigated by using the method of "". The results showed that the expression of mRNA in tissues such as liver, thymus, lung and kidney was higher than that in tissues such as liver, heart and bone.