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胃・大腸癌におけるテロメラーゼ鋳型RNAの変異の証明

胃癌和结直肠癌中端粒酶模板 RNA 突变的证明

基本信息

批准号：
08770354
负责人：
木内喜孝
金额：
$ 0.7万
依托单位：
Tohoku University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1996
资助国家：
日本
起止时间：
1996 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08770354/
关键词：
大腸癌胃癌テロメラーゼテロメア

项目摘要

本研究の目的は、テロメアelongation及びテロメラーゼ陰性を示す胃癌・大腸癌に、テロメラーゼ鋳型RNAの変異が存在しないか確認することであり、実際の研究は1,胃癌(10例)、大腸癌(62例)におけるテロメア長の測定、テロメラーゼ活性の測定により該当検体をスクリーニングする。2,RT-PCRによるテロメラーゼ鋳型RNAの増幅条件の検討、3,実際の検体におけるSSCPによる変異の検出、の3段階の順に行われた。1,テロメア長の検討では、大腸癌62検体で短縮24例、不変36例、伸長2例、胃癌10例では全例不変であった。テロメラーゼ活性の検討では、大腸癌62例中45例で陽性、17例で陰性、胃癌10例中9例で陽性、1例で陰性であった。その結果大腸癌では31例が、胃癌では1例が3)の検討対象となった。PCRの最適プライマーを設定するため4セットを作成検討し、プライマーA:5′-GCCTGGGAGGGGTGGTGGCC-3′プライマーB:5′-GCGCGGGGAGCAAAAGCACG-3′プライマーC:5′-GAACGGTGGAAGGCGGCAGG-3′プライマーAとC,AとBの順にnested PCRを行う方法が最も良い増幅を示した。さらに目的のDNAが増幅されていることをシークエンスにより確認した。3,現在大腸癌31症例、胃癌1症例についてRT-PCR, SSCPを終了し、大腸癌5症例でSSCP上異常バンドを確認している。現在この異常バンドがmutationによるものなのか、非特異的増幅産物であるのか、シークエンス解析中である。

The purpose of this study was to confirm the existence of TCR RNA in gastric and colorectal cancer by detecting its elongation and TCR negative expression. 1. To determine the length and activity of TCR in gastric (10 cases) and colorectal cancer (62 cases). 2. Analysis of amplification conditions for RT-PCR, 3. Detection of SSCP in real time, and 3-stage sequential analysis. 1. Colorectal cancer 62 cases were short in 24 cases, long in 36 cases, long in 2 cases, gastric cancer in 10 cases. 45 of 62 cases of colorectal cancer were positive and 17 negative, 9 of 10 cases of gastric cancer were positive and 1 negative. The results showed that 31 cases of colorectal cancer and 1 case of gastric cancer were detected. The optimal PCR setting is shown in Figure 4. The optimal PCR setting is shown in Figure 5. The DNA of the target was amplified and identified. 3. At present, 31 cases of colorectal cancer and 1 case of gastric cancer have been confirmed by RT-PCR and SSCP termination, and 5 cases of colorectal cancer have been confirmed by abnormal SSCP. Now the abnormal mutation is not specific, the amplitude of the product is not specific, the analysis is not specific.