結節性硬化症に発生した皮膚腫瘍、及び孤発性皮膚腫瘍におけるTSC2遺伝子の解析

结节性硬化症及孤立性皮肤肿瘤引起的皮肤肿瘤中TSC2基因分析

• 批准号: 08770658
• 负责人: 久保 宜明
• 金额: $ 0.7万
• 依托单位: The University of Tokushima
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08770658/
• 关键词: 結節性硬化症; TSC2; 皮膚腫瘍; Loss of heterozygosity; PCR-SSCP

結節性硬化症(TSC)は、常染色体優性遺伝形式をとる代表的な母斑症であり、16p13領域に局在するTSC2遺伝子は、本症の原因遺伝子のひとつとして同定された。TSC患者に発生した腎や心臓の過誤腫において、16p13領域にLoss of heterozygosity(LOH)が認められ、TSC2遺伝子は癌抑制遺伝子であると考えられている。3例のTSC患者に発生した爪囲線維腫等の皮膚腫瘍、3例の孤発性aquired fibrokeratoma、21例の有棘細胞癌において、凍結、またはパラフィン包埋組織より切片を作成し、腫瘍部分と正常組織部分のDNAを抽出した。次に、TSC2遺伝子領域(16p13)のマイクロサテライトマーカーであるD16S291のプライマー、及びTSC1遺伝子領域(9q34)のマイクロサテライトマーカーであるD9S66とD9S150のプライマーを作成し、Mg濃度やアニーリング温度等のPCRの条件を決定した。現在、上記の皮膚腫瘍において、Loss of heterozygosity(LOH)の有無を検索中であるが、今までのところ明らかなLOHを認められていない。また、TSC2遺伝子のgenomic DNA配列に対応する数個のプライマーセットを作成し、現在PCR-SSCP解析を進めている。なお、別の癌抑制遺伝子であるp16遺伝子に関して、併行してPCR-SSCP解析を進めていたが、有棘細胞癌21例中3例において遺伝子内変異を見出し、一部の有棘細胞癌の癌化においてp16遺伝子変異が一役を担っているものと考えられた。今後、TSC患者に発生した皮膚腫瘍、及び孤発性皮膚腫瘍において、TSC2遺伝子変化を引き続き検討し、腫瘍発生機構解明や診断、治療に向けて役立つ新しい知見を得たいと考えている。

tuberous sclerosis (TSC), autosomal dominant genetic forms, and the presence of TSC2 genetic elements in the 16p13 domain are also identified. TSC patients develop kidney, heart and kidney disease, and have a Loss of heterozygosity(LOH) in the 16p13 domain. 3 cases of TSC developed skin lesions such as skin lesions, 3 cases of isolated aquifers fibromatoma, and 21 cases of tumor cell carcinoma. DNA was extracted from embedded tissue sections and normal tissue sections of tumor parts. In addition, PCR conditions such as D16S291 and D9S150 in TSC2 sub-domain (16p13) and TSC1 sub-domain (9q34) were determined. Now, remember the skin swelling, Loss of heterozygosity(LOH) and whether there is a trace, now there is a trace of LOH. The genomic DNA sequence of TSC2 gene was mapped to several different sites, and PCR-SSCP analysis was performed. PCR-SSCP analysis was carried out in 3 of 21 cases of cancer cell carcinoma, and p16 gene mutation was found in one part of cancer cell carcinoma. In the future, TSC patients will develop skin lesions, isolated skin lesions, TSC2 gene transformation, and tumor development institutions to understand the diagnosis, treatment, and new knowledge.

项目成果

Y.Kubo: "Mutations of the INK4a lous in Squanous cell Carcinomas of human skin." Biochem.Biophys.Res.Commun.in press.

Y.Kubo：“人类皮肤鳞状细胞癌中 INK4a 的突变。”