トロンボポエチンの血管内皮細胞の増殖ならびに接着分子発現に及ぼす影響

血小板生成素对血管内皮细胞增殖及粘附分子表达的影响

• 批准号: 08770692
• 负责人: 小石 まゆみ
• 金额: $ 0.64万
• 依托单位: St. Marianna University School of Medicine
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08770692/
• 关键词: トロンボポエチン; 血管内皮細胞; 増殖; 接着分子; cell counting kit; ELISA

トロンボポエチン(TPO)は巨核球の増殖、分化促進作用を持ち、血小板造血作用を刺激する因子である。しかしTPOの血管内皮細胞に対する影響についての知見はほとんどない。そこでTPOが血管内皮細胞の増殖にどのような影響を及ぼすのか、また血管内皮細胞の接着因子に及ぼす影響について検討した。1)TPOの血管内皮細胞の増殖に及ぼす影響について検討するため、培養ヒト臍帯静脈由来血管内皮細胞(HUVEC)を2%FCS添加Endo-Mediaを基本培地とし各濃度のTPOを添加し、96穴プレートにて培養し、3日目、7日目、14日目にcell counting kitを用いて吸光度を測定した結果、TPO添加群、非添加群に殆ど差が認められなかった。2)TPOの血管内皮細胞の接着因子の発現に及ぼす影響について検討するため、HUVECを96穴プレートに培養し、TPO(100ng/ml)添加24時間後に抗(CD29,VLA-1,VLA-2,VLA-3,VLA-4,VLA-5,VLA-6,CD-61,HLA-DR,ICAM-1)抗体を用いてELISA法を施行した結果、TPO添加群、非添加群に殆ど差が認められなかった。3)TNF-αにより増加したHUVECの接着因子の発現が、TPOの添加により影響を受けるかどうかについて検討するため、HUVECを96穴プレートに培養し、TNF-αとTPO併用により刺激し、24時間後に2)と同様の抗体を用いてELISA法を施行した結果、TNF-αにより増加したHUVECの接着因子のうち、ICAM-1の発現のみ若干抑制傾向が認められた。以上の結果より、TPOは血管内皮細胞の増殖や接着因子の発現に殆ど影響を与えないことが示唆され、臨床応用の際、少なくとも血管内皮細胞に対し副作用を起こさない事が期待できる。

TPO promotes the growth and differentiation of megakaryocytes and stimulates platelet hematopoiesis. The effects of TPO on vascular endothelial cells are discussed in detail. The effects of TPO on vascular endothelial cell proliferation and adhesion factors are discussed. 1) The proliferation and influence of TPO on vascular endothelial cells (HUVEC) was studied in vitro. Endo-Media was added to HUVEC at 2% FCS. TPO was added to HUVEC at various concentrations in vitro. The absorbance was measured in 96-point cell counting kit at day 3, day 7 and day 14. The results showed that TPO was added to HUVEC at different concentrations. 2) Antibodies against CD29,VLA-1,VLA-2,VLA-3,VLA-4,VLA-5,VLA-6,CD-61,HLA-DR,ICAM-1 were detected by ELISA after HUVEC was cultured at 96 points and TPO(100ng/ml) was added for 24 hours. 3)TNF-α increase in expression of HUVEC adhesion factor, TPO addition in culture, TNF-α TPO co-stimulation, 24 hours later; 2) ELISA for the same antibody, TNF-α increase in expression of HUVEC adhesion factor, ICAM-1 expression in culture. These results suggest that TPO may affect the proliferation of vascular endothelial cells and the development of adhesion factors, and that TPO may play an important role in the side effects of vascular endothelial cells during clinical use.