エリスロポエチン遺伝子発現におけるサイトカインの作用とシグナル伝達機構の解析

点击翻译按钮获取中文摘要

本年度はinterleukin-6(IL-6)によるEpo遺伝子発現調節について解析を進めた。低酸素刺激下でのHep3B細胞によるEpo蛋白産生及びmRNA発現は12時間後にpeakとなるが、IL-6刺激では24時間後まで時間依存性に増加した。ゲルシフト法によりHep3B細胞にはNFIL-6結合配列(TTGCGGAAC)に特異的に結合する転写因子の存在を確認したが、この発現は対照・低酸素刺激・IL-6添加時において明らかな変化を認めなかった。またfura-2を用いて測定した[Ca^<2+>]iはIL-6添加後も上昇を認めなかった。以上より、IL-6で誘導されるEpo産生系のシグナル伝達機構は酸素センサーを介さない可能性が示唆された。生体内におけるIL-6のEpo産生調節への関与を決定するために、血液疾患患者の血清中のEpo及びIL-6を測定し、両者の関係について検討した。対象は血液疾患の患者35例(悪性リンパ腫16例、多発性骨髄腫5例、急性リンパ性白血病11例、その他4例)で、IL-6高値群(IL-6>7.5ng/ml)及び低値群(IL-6≦7.5ng/ml)の血色素量(Hb)及びEpo濃度の平均値はそれぞれ9.67g/dl、2.21mU/ml、10.66g/dl、1.764mU/mlであった。Epo濃度の対数(logEpo)の回帰式はlogEpo=3.385-0.126×Hb(IL-6高値群)、logEpo=3.303-0.144×Hb(IL-6低値群)であった。Epo濃度についてはIL-6高値群と低値群で有意差を認めた(p=0.026)が、血色素量では有意差を認めなかった(p=0.29)。以上より、IL-6はin vitro及びin vivoにおいてEpo産生調節に関与していると考えられた。