歯周組織における歯周病原因由来LPSのサイトカインネットワーク機構の解明

阐明牙周病诱导牙周组织内脂多糖的细胞因子网络机制

• 批准号: 08771600
• 负责人: 王 宝禮
• 金额: $ 0.64万
• 依托单位: Osaka Dental University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08771600/
• 关键词: 歯周疾患; LPS; サイトカイン

「目的」LPSを認識する様々な細胞表面分子が単球/マクロファージあるいは活性化した好中球や血管内皮細胞において示されGPIアンカー型の膜蛋白質であるCD14が受容体として機能するこが報告されている。近年、歯周病原性細菌由来LPSに刺激されたヒト歯肉線維芽細胞(HGF)はIL-1や6など様々なサイトカインを産生すると報告されているがHGFのLPS認識機構は明らかにされていない。本研究ではLPSに対してHGFが応答する際の認識機構と細胞内情報伝達機構を解明することが目的である。「方法」HGFへのLPS結合能、CD14の発現をFITC標識の抗体を用いてフローサイトメトリー(FACS)で分析した。さらにHGFにLPSと抗CD14抗体を添加した培養系のIL-6量をELISA法により測定した。LPS刺激HGF中のリン酸化蛋白質の存在を抗リン酸化チロシン抗体を用いてウエスタンブロット法で同定した。次にLPS刺激HGFを抗リン酸化チロシン抗体に免疫沈降させ、沈降画分を抗MAPキナーゼ抗体でウエスタンブロット法で分析した。「結果および考察」HGFにはLPS結合能とCD14の発現がみられた。抗CD14抗体、LPS添加によるHGF培養上清中にはIL-6の産生はみられなかった。LPS誘導性のチロシンリン酸化は42kDの蛋白質が著しく誘導された。以上の結果よりHGF膜上のLPS受容体はCD14と考えられ、LPSがCD14に結合しリン酸化が起こり、MAPKが活性化されるものと示唆された。「結論」歯周疾患発症のひとつの細胞内情報伝達路の可能性として、HGFに対してLPSはCD14を介してリン酸化がおこりIL-6が産生される。その結果、破骨細胞の活性化を誘導し骨吸収に至ることが考えられた。

LPS "intent" を know す る others 々 な cell surface molecule が 単 ball / マ ク ロ フ ァ ー ジ あ る い は activeness し た や vascular endothelial cells in good に お い て in さ れ GPI ア ン カ ー type の membrane protein で あ る CD14 が by let body と し て function す る こ が report さ れ て い る. In recent years, the pathogenic bacteria origin LPS 歯 weeks に stimulus さ れ た ヒ ト 歯 meat line d bud cells (HGF) は IL - 1 や 6 な ど others 々 な サ イ ト カ イ ン を produce す る と report さ れ て い る が HGF の LPS know institutions は Ming ら か に さ れ て い な い. This study で は LPS に し seaborne て HGF が 応 answer す る interstate の know institutions intelligence 伝 と cell of institutions を interpret す る こ と が purpose で あ る. "Methods" HGF へ の LPS binding energy, CD14 の 発 now を FITC を logo の antibody with い て フ ロ ー サ イ ト メ ト リ ー analysis (both FACS) で し た. Youdaoplaceholder0 HGFにLPSと anti-CD14 antibody を addition of <s:1> た culture line <s:1> IL-6 amount をELISA によ に determination of た た. LPS stimulation of HGF の リ ン acidic protein の is を resistance リ ン acidification チ ロ シ を ン antibody with い て ウ エ ス タ ン ブ ロ ッ で ト method with fixed し た. Time に LPS stimulation HGF を resistance リ ン acidification チ ロ シ に ン antibody immune sink さ せ, sink drawing を resistance to MAP キ ナ ー ゼ antibody で ウ エ ス タ ン ブ ロ ッ ト で analysis し た. The results および investigated the binding energy of HGFに に LPS とCD14 がみられた. The addition of anti-CD14 antibody and LPS to the によるHGF culture supernatant results in に みられな IL-6 <s:1> production of みられな った った った. Lps-induced <s:1> チロシ リ リ <s:1> acidification <s:1> 42kD <s:1> protein が <s:1> く く induced された. の above results よ り HGF membrane の LPS by let body は CD14 と exam え ら れ, LPS が CD14 に combining し リ ン acidification が up こ り, MAPK が activeness さ れ る も の と in stopping さ れ た. "Conclusion" 歯 発 weeks disease disease の ひ と つ の intracellular intelligence 伝 possibility of road の と し て, HGF に し seaborne て LPS は CD14 を interface し て リ ン acidification が お こ り IL - 6 が produce さ れ る. The そ <s:1> results, osteoclast <s:1> activation を induced by the aspiration of the embryonic bone に to る えられた とが to test えられた.