画像解析による耳下腺細胞のカルシウム・ストアの分布と多様性の解析

使用图像分析分析腮腺细胞中钙储存的分布和多样性

基本信息

批准号：
08771617
负责人：
谷村明彦
金额：
$ 0.64万
依托单位：
Health Sciences University of Hokkaido
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1996
资助国家：
日本
起止时间：
1996 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

HSY cellにおける細胞内カルシウム・ストアの分布と多様性オルガネラ内にmag-fura-2を取り込ませた細胞を穿孔し、顕微画像解析システム(ARGUS 50)を用いてCa^<2+>ストア内のCa^<2+>濃度([Ca^<2+>]_L)の変化を解析した.HSY cellの細胞辺縁部に無刺激時の[Ca^<2+>]_Lが1mMで、IP_3刺激により[Ca^<2+>]_Lが50μM程度まで低下するCa^<2+>ストアが多く認められた.共焦点レーザー顕微鏡および電子顕微鏡による観察で、核膜間隙と細胞辺縁部の小包体からCa^<2+>が放出される事が明らかにされた.またミトコンドリアからはCa^<2+>が放出されないが、IP_3によって開口するイオン・チャンネルが存在する可能性が示唆された.ラット耳下腺腺房細胞におけるカルシウム・ストアの分布と多様性Mag-fura-redを取り込ませた耳下腺細胞を穿孔し、共焦点レーザー顕微鏡を用いてCa^<2+>ストアの分布を解析した.耳下腺腺房細胞のCa^<2+>ストアは細胞基底部の小包体の多い部分に多く認められた.また、腺腔側の細胞膜直下や分泌顆粒の間にもCa^<2+>ストアが認められた.一方、分泌顆粒にはCa^<2+>ストアとしての機能は認められなかった.リアノジン受容体を開口させるサイクリックADPリボースやリアノジンは、耳下腺細胞からのCa^<2+>放出を起こさない事から、耳下腺細胞からのCa^<2+>放出はほとんどがIP_3感受性Ca^<2+>チャンネルによって調節されている事が示唆された.

将杂志2掺入细胞器中的HSY细胞细胞中细胞内钙存储的分布和多样性被穿孔，并使用微观图像分析系统（Argus 50）（Argus 50）。通过IP_3刺激，[Ca^<2+>] _ l降低至50μm。使用共聚焦激光器和电子显微镜进行观察表明，Ca^<2+>是从核间释放的，在细胞边缘释放了鹦鹉体。此外，尽管ca^<2+>未从线粒体中释放，但建议可能有IP_3打开的离子通道。大鼠腮腺细胞中钙存储的分布和多样性。使用共聚焦激光显微镜分析Ca^<2+>商店的分布。在大部分腮腺细胞中发现了Ca^<2+>在腮腺细胞中的储存。 Ca^<2+>也直接在细胞膜下方以及腺体腔侧的分泌颗粒之间发现。另一方面，在分泌颗粒中未观察到Ca^<2+>商店的功能。打开ryanodine受体的环状ADP核糖和ryanodine并未引起Ca^<2+>从腮腺细胞中释放，这表明大多数Ca^<2+>从腮腺细胞中释放的大多数Ca^<2+>受IP_3敏感的Ca^<2+>通道调节。