マウス骨髄細胞培養系による破骨細胞形成に対するTIMPの役割について

使用小鼠骨髓细胞培养系统观察 TIMP 在破骨细胞形成中的作用

基本信息

批准号：
08771749
负责人：
石原裕一
金额：
$ 0.58万
依托单位：
Aichi Gakuin University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1996
资助国家：
日本
起止时间：
1996 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08771749/
关键词：
骨髄細胞培養系破骨細胞 TIMP

项目摘要

結合組織を構成するコラーゲンやプロテオグリカンを主体とするマトリックス成分の分解に間質コラゲナーゼ、ゼラチナーゼ、ストロムライシンに代表されるマトリックス金属プロテアーゼ(MMP)が主体をなし、同時にこれらのMMPの共通のインヒビターとしてtissue inhibitor of metalloproteinases(TIMP)の存在が明かとなった。また最近になりTIMPはMMPのインヒビターとしての機能のみならず、様々な細胞の成長因子として注目されてきた。そこでこのTIMPが骨髄細胞培養系において破骨細胞形成に影響しているのではないかと考え研究を行った。今回の結果から培養時に使用するウシ胎児血清(FCS)から抗TIMP抗体によるアフィニティクロマトグラフィーでTIMPを除去しTIMPフリーFCSを作製し骨髄細胞培養系に用いたところ全く破骨細胞の形成は認められなかった。またTIMPフリーFCSにリコンビナントTIMP-1,2を加えこの実験系で破骨細胞の形成を調べたところ、TIMPを除去する前のFCSと同程度の破骨細胞形成が認められた。我々はこの事実からTIMPが破骨細胞前駆細胞の成熟に関与していることが明らかとなった。今後骨器官培養系の実験を行うことにより破骨細胞の活性化にTIMPにより破骨細胞の活性化にも関与しているかどうかをも同時に調べる予定である。

基质金属蛋白酶（MMP），例如基质胶原酶，明胶酶和Stromylins，是基质成分的主要降解，主要由组成结缔组织的胶原蛋白和蛋白聚糖组成，同时又揭示了金属蛋白酶（Timps）（timps）的存在（timplys hemphistiator nospe）。最近，TIMP不仅吸引了作为MMP的抑制剂，而且吸引了各种细胞的生长因子。因此，我们对结果进行了研究，认为该TIMP可能会影响骨髓细胞培养系统中的破骨细胞形成。从这项研究的结果中，通过使用抗TIMP抗体产生无TIMP FCS的亲和色谱中使用的胎儿牛血清（FC）去除TIMP，当在骨髓细胞培养系统中使用时，未观察到破骨细胞的形成。此外，将重组的TIMP-1和2添加到无TIMP FC中，并在该实验系统中研究了破骨细胞的形成，并且在去除TIMP之前，破骨细胞的形成与FCS相似。这个事实表明，TIMP参与破骨细胞前体细胞的成熟。将来，我们还将在骨骼器官培养系统上进行实验，以确定细胞是否参与TIMP激活破骨细胞。