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抗酸化PC抗体を用いたLDLの酸化変性と泡沫細胞内酸化LDL代謝の解析

使用抗氧化 PC 抗体分析泡沫细胞中 LDL 的氧化变性和氧化 LDL 代谢

基本信息

批准号：
08772108
负责人：
板部洋之
金额：
$ 0.64万
依托单位：
Teikyo University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1996
资助国家：
日本
起止时间：
1996 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

抗酸化LDLモノクローナル抗体DLH3は、アルデヒド基を含む9CHO-PCなどのPCの過酸化反応生成物をエプトープとし、免疫組織化学で病巣内のマクロファージ由来の泡沫細胞を顕著に染色する。また、この抗体を用いた酸化LDLの高感度定量法により腎透析患者血漿LDL酸化レベルが健常者の約8倍であることをすでに見出している。さらに今年度は、(1)低HDL血症を呈する遺伝性疾患であるLCAT欠損症患者の血漿LDL酸化レベルが健常者の約3.5倍であることを見出した。LCATに酸化PCを代謝する活性のあることも見出し、LCATが血漿LDL酸化変性防御因子としての役割のあることが示唆された。(2)DLH3と同様にヒト粥状硬化病巣ホモジェネートを免疫源として作製したモノクローナル抗体DLH2が、架橋蛋白質を認識することを確かめた。ヒト動脈硬化病巣をこのDLH2抗体で免疫染色すると、泡沫化したマクロファージおよびその周囲の細胞外マトリックスが陽性となり、病巣中に架橋変性を受けた蛋白質が存在することが示唆された。(3)J774マクロファージ細胞に、未処理LDL、アセチルLDL、酸化LDLを1時間取り込ませた後、細胞内での各LDLの残存量の経時変化をヒトアポBに対するサンドイッチELISAで調べた。LDLとアセチルLDLは速やかに減少(半減期30分)した。酸化LDLは半減期約90分と少し代謝速度は遅かったが、24時間後にはほとんど細部内から消失した。酸化LDLもマクロファージに取り込まれた後に完全に代謝されるのか、さらに検討中である。(4)J774マクロファージ細胞にリポ蛋白質除去血清存在下でスフィンゴンシンを加えて24時間培養すると、DLH3の免疫染色陽性になることが見いだされた。何らかの細胞刺激に伴って、おそらくリポ蛋白質には依らず、細胞膜リン脂質の酸化変性が起こりうる可能性が考えられた。現在、この様な変化を起こす条件、細胞の種類、生じた抗原の性質などを検討中である。

Anti-acidified LDL antigens DLH3 antibodies, antisense genes containing 9CHO-PC antigens PC antibodies, anti-acidified antigens, immunocytochemistry, immunostaining. Serum antibodies were detected by acidified LDL, high sensitivity quantitative method, blood LDL acidified in dialysis patients, normal subjects, about 8 times higher than in normal patients. In this year's study, (1) hypoHDL was diagnosed as a sexual disorder, patients with LCAT deficiency were suffering from LDL acidification, and those with normal blood pressure were about 3.5 times higher than those without LDL deficiency. LCAT acidified PC, LDL acidified, LDL acidified, sexual defense factor, LDL acidified, sexual defense factor, blood acidification, blood acidification, sexual defense factor, sexual defense factor. (2) DLH3 antibodies were detected in patients with atherosclerotic disease, atherosclerosis and immunogenicity. The antibody DLH2 and protein were detected by Elisa. Animal sclerotic disease, DLH2 antibody, immunostaining, foam, foam, extracellular, frame, protein, protein. (3) J774 normal cell, unprocessed LDL, unprocessed LDL, acidified LDL, after acidified LDL, the residual amount of each LDL in the cell was periodically changed. LDL costs less than 30 minutes of half a year (30 minutes for half a year). The speed of LDL is low. The half-cycle of acidizing LDL is about 90 minutes, and the speed of acidification is about 90 minutes. After 24 hours, there is no change in the temperature of the whole body. Acidify the LDL in the middle of the day. After acidification, you can completely replace the mother in the middle. (4) in the presence of serum, J774 protein was removed and cultured for 24 hours, and DLH3 immunostaining was used to detect the serum. What's wrong with cellular stimulation, protein, membrane, lipids, acidification, possibility, and so on. At present, it is necessary to improve the conditions, cell types, and antigens in the human body.