不定根形成に関する温度感受性突然変異体の単離と解析

不定根形成的温度敏感突变体的分离和分析

• 批准号: 09740591
• 负责人: 杉山 宗隆
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 1998
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09740591/
• 关键词: シロイヌナズナ; 温度感受性突然変異体; 不定根

突然変異を誘発したシロイヌナズナ集団に対して、胚軸からの不定根形成を指標とする大規模なスクリーニングを行い、1,000近い数の温度感受性変異体候補株を選抜した。このうちの約半数について二次スクリーニングを行った結果、これまでに35系統の温度感受性変異体を新規に単離することができた。温度感受性突然変異体srd2、rrd1、rrd2、rrd4を用いて、不定根および側根形成の解析を行い、以下の成果を得た。制限温度下でsrd2変異体の胚軸あるいは根の断片を培養した場合、胚軸外植片では細胞増殖が起きず根の原基(不定根)も形成されなかったが、根外植片では根の原基(側根)が形成された。制限温度下で形成された根の原基には分裂組織が構築されず、原基全体で細胞増殖が持続して瘤状の細胞塊となった。rrd1およびrrd2変異体の場合は、制限温度下での培養により帯化根の形成頻度が上昇した。これらの結果は、SDR2が増殖能レベルの励起に関与しており,増殖能をもたない胚軸組織での増殖能獲得、分裂組轡形成に先立つ増殖能の再励起に必要であること、分裂組織がそれ以外の部分での細胞増殖を抑制していること、RRD1とRRD2が増殖活性全般に関わっていること、原基あるいは分裂組織の形成に際して増殖活性の低下は増殖域の限定化を弱めること、を示唆する。また、rrd4変異体に関しては、サイトカイニン存在下で増殖能獲得段階が温度感受性を示すことが明らかとなった。srd2変異体胚軸由来カルスに対して野生型ゲノムDNAライブラリーを無作為に導入することによる、SRD2遺伝子のショットガンクローニングを数次にわたって試みた。SRD2遺伝子の導入によって変異形質が相補された可能性のあるカルスが得られたこともあったが、最終的な成功には至らなかった。しかしながら、実験の中で問題となる形質転換効率と作業効率については大幅に改善することができ、本法の実用化にはある程度の目途が立った。

A large number of temperature sensitive allogeneic candidates were selected for the selection of the index of adventitious root formation, hypocotyl formation and adventitious root formation. About half of the time, the temperature sensitivity of the 35 systems was changed. Temperature sensitivity suddenly changed srd2, rrd1, rrd2, rrd4, adventitious root formation analysis, the following results were obtained. Under the control temperature, the embryonic embryo and the adventitious root fragment of the allogeneic embryo are cultured. Under controlled temperature, the primordia of the roots were formed, the tissues were divided, and the primordia were grown, and the tumor-like cells were formed. The frequency of root formation increased when rrd1 and rrd2 were different. The results showed that SDR2 had the ability to stimulate cell growth, RRD 1 and RRD 2 had the ability to stimulate cell growth, RRD 1 and RRD 2 had the ability to stimulate cell growth, RRD 2 had the ability to stimulate cell growth, RRD 1 and RRD 2 had the ability to stimulate cell growth, RRD 2 had the ability to stimulate cell growth, RRD1 and RRD2 had the ability to stimulate cell growth, RRD1 and RRD2 had the ability to stimulate cell growth. The growth activity of the protoplast is reduced during the formation of mitotic tissue, and the growth domain is weakened. In the presence of a variety of factors, the ability to increase reproduction can be graded to indicate temperature sensitivity. srd2 allocotyl origin: wild-type: DNA: DNA SRD2 is the introduction of a variety of different qualities that complement each other. The goal of substantially improving the physical and operational efficiency of the method is to achieve the goal of improving the operational efficiency of the method.

项目成果

S.Nakajima: "Cloning and characterization of a gene (UVR3) required for photorepair of 6-4 photoproducts in Arabidopsis thaliana." Nucleic Acids Research. 26. 638-644 (1998)

S.Nakajima：“拟南芥中 6-4 个光产物光修复所需的基因 (UVR3) 的克隆和表征。”

Ozawa, S.: "Organogenic responses in tissue culture of srd mutants of Arabidopsis thaliana." Development. 125. 135-142 (1998)

Ozawa, S.：“拟南芥 srd 突变体组织培养中的有机反应。”

S.Ozawa: "Organogenic responses in tissue culture of srd mutants of Arabidopsis thaliana." Development. 125. 135-142 (1998)

S.Ozawa：“拟南芥 srd 突变体组织培养中的有机反应。”

Shoji,Y.: "Involvement of poly(ADP-ribose)synthesis in transdifferentiation of isolated mesophyll cells of Zinnia elegans into tracheary elements." Plant & Cell Physiology. 38. 36-43 (1997)

Shoji,Y.：“多聚（ADP-核糖）合成参与百日草分离叶肉细胞向气管元件的转分化。”

S.Aoyagi: "BENI and ZENI cDNAs encoding Sl-type DNases that are associated with programmed cell death in plants." FEBS Letters. 429. 134-138 (1998)

S.Aoyagi：“编码与植物程序性细胞死亡相关的 Sl 型 DNA 酶的 BENI 和 ZENI cDNA。”