根の再分化に関わる温度感受性突然変異体の単離と解析

参与根再分化的温度敏感突变体的分离和分析

• 批准号: 07740610
• 负责人: 杉山 宗隆
• 金额: $ 0.64万
• 依托单位: Tohoku University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07740610/
• 关键词: 温度感受性突然変異体; シロイヌナズナ; 器官再分化; 不定根; 脱分化

本研究では、植物の器官再分化を遺伝学的に解剖してその全体像を捉え、脱分化・再分化の基本機構を明らかにすることを目指して、シロイヌナズナの根再分化に関する温度感受性突然変異体の単離と解析を行った。エチルメタンスルフォン酸処理で突然変異を誘発し、2回の自家受粉後、個体別に種子を収穫して作出したM3系統群を対象に、胚軸からの根の再分化を指標としたスクリーニングを行い、最終的に5系統の温度感受性変異株を得た。遺伝学的解析の結果、これら5系統における温度感受性はそれぞれ異なる1遺伝子座における劣性変異に起因することが明らかとなり、当該(野生型)遺伝子座をRRD1〜5と名付けた。なお、苗条再分化を指標として既に単離していた温度感受性変異体の中で、srd2は根再分化に関しても温度感受性を示すが、rrd1〜5のいずれもsrd2とはallelicでなかった。予備的な解析により、各RRD遺伝子は脱分化から根の再分化と成長までの異なる段階に関与することが示唆された。各変異株は野生型との戻し交雑を繰り返した後に自家受粉させることで、遺伝学的な純化を行った。現在純化した変異体を用いて本格的な生理特性解析に着手している。また、器官再分化の様々な中間段階にある外値片からRNAを調製して混合し、これをもとに均一化cDNAライブラリーを作成した。今後、本ライブラリーから無作為に選んだcDNAクローンをプローブにRNAゲルブロット解析を進めることで、根再分化過程での遺伝子発現を類型化し、これに対するrrd変異の影響を調べる予定である。

This study で は, plant organs の redifferentiation を heritage に 伝 learn anatomy し て そ の all like を catch え, dedifferentiation redifferentiation の basic institutions を Ming ら か に す る こ と を refers し て, シ ロ イ ヌ ナ ズ ナ の root redifferentiation に masato す る temperature sensitivity - suddenly variants の 単 line from analytical を と っ た. エ チ ル メ タ ン ス ル フ ォ ン acid 処 Richard で suddenly - different を 発 lure し, 2 の back home after pollination, individuals don't に seed を 収 won し て make し た M3 system group を like に seaborne, hypocotyl か ら の root の redifferentiation を index と し た ス ク リ ー ニ ン グ を い, eventually に 5 system の temperature sensitivity - different strains を た. But 伝 learn analytical の results, こ れ ら 5 system に お け る temperature sensitivity は そ れ ぞ れ different な る 1 heritage 伝 stroma に お け る recessive cause - different に す る こ と が Ming ら か と な り, when the son (wild type) but 伝 を RRD1 ~ 5 と name pay け た. な お, slim redifferentiation を index と し て both に 単 from し て い た temperature sensitivity - variant の で, srd2 は root redifferentiation に masato し て も temperature sensitivity を shown す が, rrd1 ~ 5 の い ず れ も srd2 と は allelic で な か っ た. Reserve な resolution に よ り, each RRD but 伝 は dedifferentiation か ら root の redifferentiation と growth ま で の different な る Duan Jie に masato and す る こ と が in stopping さ れ た. Each - different strains は wild-type と の 戻 し pay 雑 を Qiao り return し た に after their nectar さ せ る こ と で, but 伝 learn な purification を っ た. Now, the purification of the <s:1> た variant を is carried out by using the な physiological characteristics of the <s:1> て principal to analyze に and start with <s:1> て る る る. ま た, organ redifferentiation の others 々 な middle Duan Jie に あ る outside nt piece か ら RNA を modulation し て mixed し, こ れ を も と に homogenization cDNA ラ イ ブ ラ リ ー を made し た. In the future, this ラ イ ブ ラ リ ー か ら inaction に choose ん だ cDNA ク ロ ー ン を プ ロ ー ブ に RNA ゲ ル ブ ロ ッ ト parsing を into め る こ と で, root regeneration process で の posthumous son 伝 発 now を typed し, こ れ に す seaborne る RRD - different の influence を adjustable べ る designated で あ る.

项目成果

杉山宗隆: "植物苗条再分化にかかわる温度感受性突然変異体." バイオサイエンスとインダストリー. 53. 529-531 (1995)

Munetaka Sugiyama：“参与植物芽再分化的温度敏感突变体”，生物科学与工业，53. 529-531 (1995)。

Richard W. Joy IV: "Cloning and characterization of polyphenol oxidase cDNAs of Phytolacca americana." Plant Physiology. 107. 1083-1089 (1995)

Richard W. Joy IV：“美洲商陆多酚氧化酶 cDNA 的克隆和表征。”

Masahiko Kobayashi: "Isolation of cDNAs encoding GTP cyclohydrolase II for Arabidopsis thaliana." Gene. 160. 303-304 (1995)

Masahiko Kobayashi：“分离编码拟南芥 GTP 环水解酶 II 的 cDNA。”