発現遺伝子のカタログ化による維管束組織分化初期過程の分子機構の解析

通过表达基因编目分析血管组织分化早期过程的分子机制

• 批准号: 09740587
• 负责人: 出村 拓
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 1998
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09740587/
• 关键词: 管状要素分化; ヒャクニチソウ; TED遺伝子; プロモーター解析; サブトラクション; 免疫組織化学

維管束組織分化の初期過程に発現する遺伝子をその発現様式や機能をもとにカタログ化することを通して、維管束組織分化の初期過程おける分子機構に迫ることを目的とした解析を行った。まず、ヒャクニチソウin vitro管状要素分化系の形態形成に先立つ過程で発現する遺伝子を単離し、次に、単離した遺伝子の維管束組織における発現様式を明らかにする。そして、これまでに単離しているTED遺伝子群の発現様式を含めて、発現様式と機能による遺伝子のカタログ化を試みる。このような発現遺伝子のカタログ化により、これまで明らかにされてこなかった維管束組織分化の初期過程で進行している分子機構の一側面に迫れるものと考えた。1 TED4タンパク質の機能解析を試みた。TED4タンパク質はオオムギの糊粉層特異的脂質輸送タンパク質(LTP2)の配列と類似している。LTP2はシステインプロテアーゼの阻害活性を持つことが報告されており、TED4タンパク質が管状要素分化の細胞死に関連して発現するシステインプロテアーゼ活性を阻害することが予想された。そして、大腸菌を用いて発現させた組み換えTED4タンパク質がシステインプロテアーゼ活性の一部を阻害することを明らかにした。また、ヒャクニチソウin vitro管状要素分化系を用いたトランジェントアッセイ法を開発し、TED3プロモーターの詳細な解析を行った。TED3タンパク質が新規のアラビノガラクタンタンパク質をコードしている可能性を明らかにした。2 ヒャクニチソウin vitro管状要素分化系を用いて、維管束組織分化の初期過程に発現する新たな遺伝子の単離を試みた。このために、PCRを併用するサブトラクション法と均一化ライブラリーの構築を行った。

Vascular tissue differentiation process early の に 発 now す る heritage 伝 son を そ の 発 presently others type や function を も と に カ タ ロ グ change す る こ と を tong し て, vascular tissue differentiation process early の お け る molecular agencies forced に る こ と を purpose と し た parsing line を っ た. ま ず, ヒ ャ ク ニ チ ソ ウ differentiation in vitro tubular elements is の morphogenetic に first set つ process で 発 now す る posthumous son 伝 を 単 に し, times, 単 し た posthumous son 伝 の vascular tissue に お け る 発 presently others type を Ming ら か に す る. そ し て, こ れ ま で に 単 from し て い る TED heritage 伝 subgroup の 発 now contains others type を め て, 発 presently others type と functional に よ る posthumous son 伝 の カ タ ロ グ change を try み る. こ の よ う な 発 now heritage 伝 son の カ タ ロ グ change に よ り, こ れ ま で Ming ら か に さ れ て こ な か っ た vascular tissue differentiation の で early process し て い る molecular institutions の side に forced れ る も の と exam え た. 1 TED4タ パ パ analysis of the function of the みた try みた. TED4タ パ パ hypophyll <s:1> hypophyll ムギ <s:1> alury-specific lipid transport タ <e:1> パ hypophyll (LTP2) <s:1> arrangement と similar to て る る る る る る. LTP2 は シ ス テ イ ン プ ロ テ ア ー ゼ の resistance against active を hold つ こ と が report さ れ て お り, TED4 タ ン パ ク qualitative が tubular elements の cells die に masato even し て 発 now す る シ ス テ イ ン プ ロ テ ア ー ゼ active を resistance against す る こ と が to think さ れ た. そ し て, coliform を い て 発 now さ せ み た group in え TED4 タ ン パ ク qualitative が シ ス テ イ ン プ ロ テ ア ー ゼ active の a を resistance against す る こ と を Ming ら か に し た. ま た, ヒ ャ ク ニ チ ソ ウ differentiation in vitro tubular elements is を with い た ト ラ ン ジ ェ ン ト ア ッ セ イ method を open 発 し, TED3 プ ロ モ ー タ ー の detailed analytical line を っ な た. TED3 タ ン パ ク qualitative が new rules の ア ラ ビ ノ ガ ラ ク タ ン タ ン パ ク qualitative を コ ー ド し て い る possibility を Ming ら か に し た. 2 ヒ ャ ク ニ チ ソ ウ differentiation in vitro tubular elements is を with い て, vascular tissue differentiation process early の に 発 now す る new た な posthumous son 伝 の 単 from を try み た. を こ の た め に, PCR and す る サ ブ ト ラ ク シ ョ ン method of homogenization ラ と イ ブ ラ リ ー の line build を っ た.

项目成果

Igarashi,M.: "Expression of the Zinnia TED3 promoter in developing tracheary elements of transgenic Arabidopsis." Plant Molecular Biology. (in press). (1998)

Igarashi,M.：“百日草 TED3 启动子在转基因拟南芥气管元件发育中的表达。”

M.Igarashi: "Expression of the Zinnia TED3 promoter in developing tracheary elements of transgenic Arabidopsis" Plant Mol.Biol.36. 917-927 (1998)

M.Igarashi：“百日草 TED3 启动子在转基因拟南芥气管元件发育中的表达”Plant Mol.Biol.36。

H.Usuda: "Development of sink capacity of the “storage root"in a radish cultivar with a high ratio of “storage root" to shoot." Plant Cell Physiol.(in press). (1999)

H.Usuda：““贮藏根”与芽比例较高的萝卜品种的“贮藏根”库容量的发展。（植物细胞生理学）（1999 年）。

Yamamoto,R.: "Brassinosteroids induce entry into the final stage of tracheary element differentiation in cultured Zinnia cells." Plant and Cell Physiology. 38. 980-983 (1997)

Yamamoto,R.：“油菜素类固醇诱导培养的百日草细胞进入气管元件分化的最后阶段。”