权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

ミジンコにおける低酸素濃度に応答したヘモグロビン遺伝子の発現誘導機構

水蚤响应低氧浓度血红蛋白基因表达的诱导机制

基本信息

批准号：
09760101
负责人：
時下進一
金额：
$ 1.41万
依托单位：
Tokyo University of Pharmacy and Life Science
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1997
资助国家：
日本
起止时间：
1997 至 1998
项目状态：
已结题

项目摘要

オオミジンコ(Daphnia magna)は血リンパ中に16量体ヘモグロビンを複数種類有し,その発現量を迅速に増加させることで溶存酸素濃度の低下に適応している。これらのヘモグロビンを構成するサブユニット鎖は2つのヘム結合部位を持つ2-ドメイン構造を有することが知られている。染色体歩行によりヘモグロビン遺伝子群を含む約13kbの染色体全域の全塩基配列を決定した。その結果,4つの遺伝子が同一の方向に隣接して存在することが明らかになり,その遺伝子間配列にはヒトやマウスで見出されている低酸素下で働く転写囚子HIFIの認識配列(CACGTG)と相同な配列が複数存在することがわかった。現在、ミジンコの核抽出液を調製しHIFIの認識配列と予想される配列を含むDNAを用いて、ゲルシフトアッセイを行っている。オオミジンコより精製したヘモグロビンを二次元ゲル電気泳動により6種類のサブユニット鎖に分離し、そのサブユニット鎖のN末端アミノ酸配列を決定した。その結果、4種類のサブユニット鎖の存在が明らかとなった。このヘモグロビンを未変性の条件下で等電点電気泳動により分離した結果、6種類のヘモグロビンからなることが示された。低酸素条件及び通常酸素条件下で飼育したオオミジンコから陰イオン交換カラムを用いてヘモグロビンを粗精製し,各々を二次元ゲル電気泳動によりサブユニット鎖に分離した。結果,6種類のサブユニット鎖は全て低酸素下で誘導を受けていること、通常酸素条件下では主に2種類のサブユニット鎖が発現していることが明かとなった。また、現在塩基配列が決定されている3種類のサブユニット鎖についてはノーザンブロットの結果から、転写の段階で誘導されていることが示された。これらのことから、6種類のサブユニット鎖はそれぞ異なった発現を示すものと考えられる。

Daphnia magna is the most common form of soluble acid in the body. The amount of soluble acid in the body increases rapidly and the concentration of soluble acid decreases rapidly. The structure of the two-dimensional structure is known as the two-dimensional structure. The chromosome sequence is determined by the sequence of chromosomes containing approximately 13kb of the entire chromosome region. As a result, 4 pairs of sequencers exist adjacent to each other in the same direction, and 4 pairs of sequencers are arranged in the same direction. Now, the nuclear extract of the protein is modulated, and the sequence of the protein is expected to contain DNA. The separation of six kinds of protein and the determination of the N-terminal amino acid sequence of protein and amino acid sequence of protein The results of the four kinds of The results of isoelectric point electrophoresis under different conditions are shown in Table 1. Under low acid conditions and high acid conditions, the growth rate of rice was increased, and the growth rate of rice was increased. The results showed that 6 species of the protein were induced under low pH condition, and 2 species of the protein were induced under normal pH condition. In addition, the current base allocation is determined by the three types of support lock, the result of the support lock, and the stage induction of the support lock. 6 kinds of