魚類寄生粘液胞子虫類の宿主認識と侵入のメカニズム

鱼类寄生粘孢子虫的宿主识别和入侵机制

• 批准号: 09760175
• 负责人: 横山 博
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 1998
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09760175/
• 关键词: 粘液胞子虫; 宿主特異性; CFSE; レクチン; 粘液; 蛍光色素; fura2; 細胞内カルシウム

サケ科魚類の神経系に寄生する粘液胞子虫Myxobolus arcticusと、コイの結合組織に寄生するThelohanellus hovorkaiについて、宿主特異性の発現メカニズムをin vivoとin vitroにおける実験系により調べた。in vivo感染実験は、各粘液胞子虫の放線胞子を蛍光色素CFSEで標識してから感染させ、攻撃試験直後に固定して侵入した胞子原形質を蛍光顕微鏡で検出・計数した。その結果、M.arcticusの場合は感受性魚種のサクラマスにも非感受性のベニザケにも同程度侵入したが、最終的にはベニザケでは胞子形成に到らなかった。一方、T.hovorkaiの場合は、感受性のコイには侵入したが、非感受性のキンギョには侵入がほとんどみられなかった。In vitroにおける実験では、各種魚類の体表粘液を採取し、粘液中の含有タンパク量を数段階に設定して放線胞子と接触させた後、胞子原形質離脱率を測定した。その結果、T.hovorkaiはコイとキンギョのどちらの粘液に対しても反応したが、反応が起こるタンパク量の閾値に大きな差があった。すなわち、コイの粘液ではタンパク量16μg/mlでも反応したが、キンギョの場合は600μg/mlでないと反応しなかった。さらに、放線胞子が粘液中のどのような糖鎖を認識するのかを調べるため、粘液に各種レクチンを添加してから胞子と反応させる方法を標準化した。以上より、T,hovorkaiは、放線胞子の侵入時点において魚の体表粘液中のある種の特異的糖鎖構造を認識してコイに選択的に侵入することがわかった。一方、M.arcticusの場合は、侵入時点では魚種に非特異的であったことから、感染後の発育過程で適合魚種とそうでない魚種との間に違いが出てくると推察された。

Myxobolus arcticus, Thelohanellus hovorkai, host-specific development in vivo, in vitro, in vivo, in vitro, in vitro, in vivo, in vitro, in vivo, in vitro, in vitro, in vivo, in vitro In vivo infection, each slime spore emits a fluorescent pigment CFSE to identify the infection, attack the test, and then fix the invasion of the spore prototype. In the case of M.arcticus, the susceptible species are not susceptible to the same degree of invasion, and the final species are not susceptible to the formation of spores. In the case of T.hovorkai, the sensitivity is not invasive, and the non-sensitivity is not invasive. In vitro, the body surface mucus of various fish was collected, the amount of fish in the mucus was set at several levels, and the rate of protoplast separation was determined after the contact of the spores. As a result, T.hovorkai has a large difference in the threshold value of the liquid. The viscosity of the solution is 16μg/ml, and the viscosity of the solution is 600μg/ml. To standardize the method of adjusting the sugar lock in the mucus and the method of adding the sugar lock in the mucus. The above mentioned T,hovorkai, the invasion time of the emission spore, the recognition of the species-specific sugar lock structure in the fish body surface mucus, and the invasion time of the selected fish. A party, M.arcticus occasion, invasion time, species, non-specific, post-infection development process, suitable for species, species, violation, detection,

项目成果

Yokoyama H.& Urawa S.: "Fluorescent labelling of a ctinospates for determining the portals of entry into fish" Diseases of Aquatic Organisms. 30・3. 165-169 (1997)

横山 H. 和浦和 S.：“用于确定进入鱼类的门户的荧光标记”水生生物疾病 30・3（1997 年）。