非病原性アメーバ株の形質変換による赤痢アメーバ病原性関連遺伝子の解析

通过非致病阿米巴菌株转化分析溶组织内阿米巴致病相关基因

• 批准号: 09770171
• 负责人: 佐貫 潤一
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: Keio University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 1998
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09770171/
• 关键词: 赤痢アメーバ; 病原性; アメーバ症; 形質転換; リポフェクション; リポソーム

これまで赤痢アメーバ(Entamoeba histolytica)の病原性に関与すると考えられている因子は複数が報告されている。我々は、既に遺伝子情報の明らかにされた因子のin vivoでの機能を解析するために、E,histolytica及び非病原性のE.disparにこれらの遺伝子を導入し、強制発現させ、発現型の変化を検討する系を作成することを目的とした。E.histolyticaへの遺伝子導入にはエレクトロポレーションよりも、リポフェクタミンを用いたリポフェクションが優れた導入効率を示した。導入した遺伝子としては、細胞接着に関与することが示されているガラクトース阻害性レクチン(HGL5)、システイン代謝に関与するシステイン合成酵素(CS)、及びコントロールとして蛍のルシフェラーゼ(LUC)を用いた。CS及びLUCは過剰発現が達成されたが、HGL5の過剰発現は見られなかった。その理由は不明であった。CSを過剰発現したアメーバ株は過酸化水素などの酸化物に対して低い程度ながら耐性を示した。この結果は赤痢アメーバにおいて、システイン合成経路が抗酸素機能をもつことを直接的に示したものであった。E.disparへの導入は多くの種類のイオン性・非イオン性リポソームを試みたが、効率的に導入できる商業的担体はなく、E.disparに適合する脂質の種類、特にコレステロールなどの割合を至適化することが必要であると思われる。

こ れ ま で dysentery ア メ ー バ (Entamoeba histolytica) の pathogenicity に masato and す る と exam え ら れ て い る factor は plural が report さ れ て い る. I 々 は, both に heritage 伝 child intelligence の Ming ら か に さ れ の た factor in vivo で の function analytical す を る た め に, E, histolytica and び avirulence の E.d ispar に こ れ ら の posthumous son 伝 を import し, forced 発 now さ せ, 発 is の variations change を beg す 検 を る department made す る こ と を purpose と し た. E.h istolytica へ の posthumous son 伝 import に は エ レ ク ト ロ ポ レ ー シ ョ ン よ り も, リ ポ フ ェ ク タ ミ ン を with い た リ ポ フ ェ ク シ ョ ン が optimal れ た import を working rate in し た. Import し た posthumous son 伝 と し て は, cells then に masato and す る こ と が shown さ れ て い る ガ ラ ク ト ー ス resistance against sexual レ ク チ ン (HGL5), シ ス テ イ ン metabolic に masato and す る シ ス テ イ ン synthetic enzyme (CS), and び コ ン ト ロ ー ル と し て 蛍 の ル シ フ ェ ラ ー ゼ (LUC) を い た. CS and びLUC が achieve が, HGL5 <s:1> achieve see られな られな った った. Youdaoplaceholder0 そ reason is unknown であった. CS を before turning 発 now し た ア メ ー バ plant water acidification passes は element な ど の acidification content に し seaborne て low degree of い な が ら patience を shown し た. こ の results は dysentery ア メ ー バ に お い て, シ ス テ イ ン synthetic 経 road が acid element function を も つ こ と を direct に shown し た も の で あ っ た. E.d ispar へ の import は more く の kinds の イ オ ン sex, not イ オ ン sex リ ポ ソ ー ム を try み た が, sharper rate に import で き る supporter of commercial は な く, E.d ispar に suitable す る lipid の types, に コ レ ス テ ロ ー ル な ど の cut close を to optimization す る こ と が necessary で あ る と think わ れ る.