消化管粘膜細胞の遊走・増殖・分化、癌化機構における増殖因子及びCOX2の役割

生长因子和COX2在胃肠道粘膜细胞迁移、增殖、分化和癌变中的作用

• 批准号: 09770383
• 负责人: 清水 秀剛
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: Juntendo University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 1998
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09770383/
• 关键词: 炎症性腸疾患; Cyclooxygenase 2; Rat Intestinal Epithelial Cell; Lipopolysaccharide; Interferonγ; Inducible Nitric Oxide Synthase; NF-kappa B; cyclooxygenase2; transfection; 胃粘膜損傷修復; sense; antisense

近年、潰瘍性大腸炎を始めとする炎症性腸疾患で腸管上皮紐胞にCyclooxygenase2(COX2)とInducible Nitric Oxide Synthase(i-NOS)が発現していることが報告されている。これらの物質の炎症及び癌化への関与について種々の報告がなされているが相互関係については一定の見解が得られていない。今回、Phenotypeが、正常細胞に近いRat Intestinal Epithelial Cell(RIE cell)にCyclooxygenase2(COX2)をoverexpressionさせた細胞及びparental cellを使用しLipopolysaccharide(LPS)とinterferon γ(IFNγ)を投与し、i-NOSの発現を調べた。その結果1、 Parental cellでは、LPSIFN両者を投与したとき6-12時間後をピークi-NOS蛋白貿が、3時間をピークにi-NOS m-RNAの発現が認められた。2、 COX2をoverexpressionさせたRIE cellでは、i-NOSの発現が蛋白質、m-RNAの両者で低下していた。3、 i-NOSの発現調節に及ぼすCOX2の影響を調べるためにIFNの転写因子であるIRF-1蛋白の発現とLPSの転写因子であるNF-kappa B活性につきGel shift assayで調べたところ、COX2 overexpressd cell群で、NF-kappaBの発現の低下を認めた。4、 NF-kappa Bのcomponentを調べる為、Super shift assayを施行した。その結果、parental cellのNF-kappa Bは、p65とP50のhetero dimmerとp50のhomo dimmerの2つより横成されており、COX2 overexpressd cellでは、p65とP50のhetero dimmerのみで構成されていた。以上の結果が、いかなる影響を炎症性腸疾患の病態に与えているかをNF-kappa Bによって制御されるケモカインの発現や、NOにより引きおこされるアポトーシスの関係から今後は調べて行く予定である。

In recent years, ulcerative colitis has been reported as an inflammatory bowel disease in which cycloxygenase 2 (COX 2) and inducible Nitric Oxide Synthase (i-NOS) are found in intestinal epithelium. The relationship between inflammation and carcinogenesis of substances and the relationship between them are reported. In this study, Phenotype was used to modulate the expression of i-NOS in Rat Intestinal Epithelial Cell (RIE cell), Cycloxygenase 2 (COX 2), and Parental Cell by using lipopolysaccharide (LPS) and interferon γ (IFN γ). 1. Parental cell and LPS mRNA expression 6 - 12 hours later, i-NOS protein expression 3 hours later 2. COX-2 overexpression in RIE cells, i-NOS expression in protein, m-RNA, and RNA decreased. 3. The regulation of i-NOS expression and the influence of COX-2 on IFN expression factors, the regulation of IRF-1 protein expression and LPS expression factors, the regulation of NF-kappa B activity, the overexpression of COX-2 and the decrease of NF-kappa B expression. 4. NF-kappa B component adjustment, Super shift assay implementation The results of the study, parental cell NF-kappa B, p65 P50 tero dimmer p50 homo dimmer 2, COX2 overexd cell, p65 P50 tero dimmer The above results show that the relationship between the pathogenesis of inflammatory bowel disease and the development of NF-kappa B, NO and NF-kappa B in the future will be adjusted.