分子生学的アプローチによる伊東細胞の形質転換に及ぼすレチノイドの作用の研究

使用分子生物学方法研究类视黄醇对 Ito 细胞转化的影响

• 批准号: 07770388
• 负责人: 清水 秀剛
• 金额: $ 0.64万
• 依托单位: Juntendo University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07770388/
• 关键词: 肝線維症

肝線維化の際に出現する伊東細胞の筋線維芽細胞への形質転換の機序と、Vitamin Aの投与による肝線維化の抑制を検討するため、CCl_4投与ラット肝線維化モデルを作製した。4〜5週齢のWister系雌ラットにCCl_4を0.1mg/100g(体重)量で週2回腹腔内投与し、その際に、30000IUのレチノールパルミテートを週1回腹腔内投与して、形態的な変化の観察を行った。しかしながら、30000IUのレチノールパルミテートを投与されたラットは投与後、6週後頃より活動性が低下し、皮膚・体毛の粗造、四肢の骨端部変形を来して8週頃に死亡する例がほとんどであった。14週までの投与スケジュール後に採血等のチェックを行う予定であったため、レチノールの血中濃度などについては不明であったが四肢骨端部の変形からVitamin A中毒を疑った。研究の継続が困難となったためレチノールの投与量を、10000IU、5000IU、2000IUに変更して肝線維症モデルに投与し、肝線維症の抑制が行えるかどうかを検討している。CCl_4投与肝線維化モデルからは伊東細胞を還流法によって取り出し、AGPC法によってそれぞれレチノイン酸レセプター(RAR)のmRNAおよびレセプター蛋白を含めたRNAと蛋白分画を抽出した。肝に特異的に多く含まれているとされているRAR-βおよび、RXR-α蛋白について、市販の特異的抗体を用いたwestern blot法により、線維化による伊東細胞内のレセプター蛋白の変化を検討している。今回の4〜5週齢のラットを用いた肝線維症モデルからの、14週後の還流法による伊東細胞の取り出しとRNAの抽出は従来使用されている老齢ラットからの還流にくらべて収量が不十分であったため、RNAの抽出に関しては満足な結果が得られなかった。

Liver line dimensions の interstate に appear す る Mr ITO cells の muscle line d bud へ の form quality planning in の machine sequence と, cast with Vitamin A の に よ る liver line dimensions の inhibit を beg す 検 る た め, cast and CCl_4 ラ ッ ト liver line dimensions モ デ ル を cropping し た. Department of 4 ~ 5 weeks 齢 の Wister female ラ ッ ト に CCl_4 を quantity (weight) of 0.1 mg / 100 g で week 2 intraperitoneal cast back and し そ の interstate に, 30000 iu の レ チ ノ ー ル パ ル ミ テ ー ト を week 1 intraperitoneal cast back and し な て, form - the の 観 examine を line っ た. し か し な が ら, 30000 iu の レ チ ノ ー ル パ ル ミ テ ー ト を cast with さ れ た ラ ッ ト は cast and worthy of the よ, six weeks after り active low が し, skin, hair の shoddy, limb の bone ends - shaped を to し て worthy of the に death eight weeks す る example が ほ と ん ど で あ っ た. Cast with 14 weeks ま で の ス ケ ジ ュ ー ル に after blood etc. の チ ェ ッ ク を line う designated で あ っ た た め, レ チ ノ ー ル の blood levels な ど に つ い て は unknown で あ っ た が four limbs which end の - shaped か ら Vitamin A toxicity を suspected っ た. Research の 継 続 が difficult と な っ た た め レ チ ノ ー ル の with を, 10000 iu, 5000 iu, 2000 iu に - more し て disease of liver line d モ デ ル に cast with し line, liver line d の inhibit が え る か ど う か を beg し 検 て い る. Cast and CCl_4 liver line dimensions モ デ ル か ら は を Mr ITO cells also flow method に よ っ て in り し, AGPC に よ っ て そ れ ぞ れ レ チ ノ イ ン acid レ セ プ タ ー (RAR) の mRNA お よ び レ セ プ タ ー protein contains を め た RNA と protein points draw を spare し た. Liver に specific に く more contain ま れ て い る と さ れ て い る RAR - beta お よ び, RXR alpha protein に つ い を の て, city vendor specific antibody with い た western blot method に よ り, line d に よ る Mr ITO cell の レ セ プ タ ー protein の variations change を beg し 検 て い る. Today back to の 4 ~ 5 weeks 齢 の ラ ッ ト を with い た disease of liver line d モ デ ル か ら の, 14 weeks after の also flow method に よ る の Mr ITO cells take り out し と RNA の spare は 従 using さ れ て い る old 齢 ラ ッ ト か ら の also flow に く ら べ て が 収 quantity is not very で あ っ た た め, RNA の drew に masato し て は against the result of foot な が ら れ な か っ た.