特発性心筋症における癌遺伝子・癌抑制遺伝子発現についての分子病理学的検討

(1)肥大型心筋症における心筋ミオシン重鎖(β-MHC)遺伝子点変異の検出:久留米大学医学部第三内科および関連医療施設に入院し、本研究のプロトコールに対してインフォームドコンセントが得られた肥大型心筋症症例51例とその家族62例について、末梢静脈血白血球細胞よりゲノムDNAを抽出した。PCR法を用いて心筋β-MHC遺伝子の各エクソン毎にDNAを増殖した後、SSPC法を用いて各エクソンについて心筋症症例及び家族のDNA塩基配列の異常をスクリーニングした。心筋症症例のうち13例にβ-MHC遺伝子のいずれかのエクソンにDNA塩基配列の異常か認められた。これらの塩基配列の異常を見いだされたエクソンについて、現在、直接塩基配列決定法を施行し遺伝子変異の同定をすすめている。また、心筋症症例の家族についても同様の検討を開始した。(2)心筋生検標本の病理学的・分子病理学的検討:インフォームドコンセントが得られた上記の肥大型心筋症症例51例において、経静脈的に右室側心室中隔より各症例につき数個の心筋生検標本を採取した.各症例について光学顕微鏡的および電子顕微鏡的組織学的検討、免疫組織学的検討、RT-PCR法を用いたプロトオンコジーン発現の検討を現在行っている.肥大型心筋症の光学顕微鏡的特徴として、心筋細胞径、心筋細胞変性・錯綜配列・間質線維化の程度および心筋細胞死の有無について検討している。電子顕微鏡的には、心筋フィラメント配列の変化、心筋細胞におけるアポトーシス・ネクローシスを示唆する所見の有無について検討している。さらに、免疫組織学的にアポトーシス関連蛋白質bcl-2,BAX,p53の発現の検討を行っている。

(1)肥大型心筋症における心筋ミオシン重鎖(β-MHC)遺伝子点変異の検出:久留米大学医学部第三内科および関連医療施設に入院し、本研究のプロトコールに対してインフォームドコンセントが得られた肥大型心筋症症例51例とその家族62例について、末梢静脈血白血球細胞よりゲノムDNAを抽出した。PCR法を用いて心筋β-MHC遺伝子の各エクソン毎にDNAを増殖した後、SSPC法を用いて各エクソンについて心筋症症例及び家族のDNA塩基配列の異常をスクリーニングした。心筋症症例のうち13例にβ-MHC遺伝子のいずれかのエクソンにDNA塩基配列の異常か認められた。これらの塩基配列の異常を見いだされたエクソンについて、現在、直接塩基配列決定法を施行し遺伝子変異の同定をすすめている。また、心筋症症例の家族についても同様の検討を開始した。(2)心筋生検標本の病理学的・分子病理学的検討:インフォームドコンセントが得られた上記の肥大型心筋症症例51例において、経静脈的に右室側心室中隔より各症例につき数個の心筋生検標本を採取した.各症例について光学顕微鏡的および電子顕微鏡的組織学的検討、免疫組織学的検討、RT-PCR法を用いたプロトオンコジーン発現の検討を現在行っている.肥大型心筋症の光学顕微鏡的特徴として、心筋細胞径、心筋細胞変性・錯綜配列・間質線維化の程度および心筋細胞死の有無について検討している。電子顕微鏡的には、心筋フィラメント配列の変化、心筋細胞におけるアポトーシス・ネクローシスを示唆する所見の有無について検討している。さらに、免疫組織学的にアポトーシス関連蛋白質bcl-2,BAX,p53の発現の検討を行っている。