Thrombospondinの血管内皮細胞におけるPAI-1産生増加作用の検討

检查血小板反应蛋白对增加血管内皮细胞 PAI-1 产生的影响

• 批准号: 07770548
• 负责人: 村石 昭彦
• 金额: $ 0.64万
• 依托单位: Kurume University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07770548/
• 关键词: トロンボスポンジン; TGF-β1; PAI-1; 血管内皮細胞

トロンボスポンジン(TSP)は血小板より放出される多機能糖蛋白質で、内皮、平滑筋細胞からも発現され血栓形成や動脈硬化の進展に重要である。今までA549細胞を用いて検討してきた中で、外因性TSP投与で内因性TGF-β1の産生が増加し、引き続きPAI-1の産生を増加させること、つまりTSPの作用が直接的でなくTGF-β1を介し作用する可能性を示した。血管内皮細胞でも同様のメカニズムの存在が疑われ、現在その機序を研究している。心臓内皮細胞でのTSPの役割は殆ど研究されていないが、活性化された血小板や内皮細胞傷害された平滑筋細胞から放出されたTSPが、TGF-β1の作用を介してPAI-1の産生を増加させるとすれば、血栓溶解を妨げ、虚血性心臓病、動脈硬化の進展に重大な影響を及ぼすことになる。未発表だが、科研費補助研究で、ラット心筋内の内皮細胞では、免疫組織化学的検討で他臓器の内皮細胞よりも高度のTSPが発現している所見を得た。さらに、心筋梗塞や高血圧作製ラットモデルで心筋細胞自体からも再発現されることを見いだし今年度の日本循環器学会にて発表する。TSPの作用には内因性TGF-β1の役割が重要であるという仮説を検証するため、in vitroの系で、精製TSPを血管内皮細胞に投与後、TGF-β1, PAI-1の産生を蛋白レベル、mRNAレベルで検討している。今までにTGF-β1単独投与でもPAI-1レベルは上昇するという結果を得始めており、継続して、1) TSP抗体の投与によりTGF-β1, PAI-1の上昇は抑えられる、2)しかしTGF-β1 antisenseを事前に内皮細胞に導入しておけばTGF-β1, TSPいずれの作用も抑制する 等の作業仮説を引き続き証明したい。来年度はこれに加え、完全長のTSP cDNAをHVJベクターを利用して血管内皮細胞にin vitro遺伝子導入して内因性TSPの作用、特にTGF-β1, PAI-1との関連性と循環器疾患における意義を検討して行きたい。

Platelet release of multifunctional glycoproteins, endothelial cells and smooth muscle cells are important for the development of thrombosis and atherosclerosis. In this paper, we discuss the possibility that exogenous TSP and endogenous TGF-β1 production increase in A549 cells, and that exogenous TSP and PAI-1 production increase in A549 cells directly. The existence of vascular endothelial cells is suspected, and the mechanism of vascular endothelial cells is studied. The role of TSP in endothelial cells of the heart is studied in the development, activation, platelet endothelial cell injury, smooth muscle cell release of TSP, the role of TGF-β1 mediates PAI-1 production, thrombosis, hemorrhagic heart disease, and progression of atherosclerosis. The findings of undiscovered, research funded studies, immunohistochemical studies of endothelial cells in the heart muscle, and high levels of TSP in other organs were found This year's Japan Society of Circulators published a report on the development of autogenous reactivation of cardiac muscle cells in patients with myocardial infarction and hypertension. The role of TSP in endogenous TGF-β1 activation is important, and the expression of TGF-β1 and PAI-1 protein and mRNA are examined in vitro, purified TSP and vascular endothelial cells after administration. The results showed that TGF-β1 alone and PAI-1 alone increased and decreased. 1) The administration of TSP antibody decreased the increase of TGF-β1 and PAI-1. 2) TGF-β1 antisense was introduced into endothelial cells in advance and inhibited the effect of TGF-β1 and TSP. In the coming years, the role of endogenous TSP in vascular endothelial cells, especially TGF-β1, PAI-1, and related circulatory disorders will be discussed.