臨床応用を目指した8;21転座を有する急性骨髄性白血病に対するリボザイムの開発とその作用機序の解明

8;21易位急性髓系白血病核酶的开发及其临床应用作用机制的阐明

• 批准号: 09770831
• 负责人: 松下 弘道
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: Keio University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 1998
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09770831/
• 关键词: リボザイム; AML1; MTG8; 細胞増殖抑制; apoptosis; lipofection

本研究は、8;21転座を有する急性骨髄性白血病に特異的に認められその原因に関与していると考えられているAML1/MTG8異常融合遺伝子に対するリボザイムによる白血病細胞増殖抑制機構を解明し、モデルマウスを作成してこれを用いて実際の臨床応用を目指した基礎的検討を推し進めることを目的としている。1. 8;21転座を有する白血病細胞に対するリボザイムの分子生物学的抑制機構の解明昨年までの結果でAML1/MTG8リボザイムによる増殖抑制にはapoptosisが関与していることが明らかとなった。apoptosisのメカニズムを解明するためにAML1/MTG8リボザイムを8;21転座を有する白血病細胞株であるKasumi-1細胞に遺伝子導入して、この時のapoptosis関連蛋白の発現をウエスタンプロット法にて検討した。Bcl-2やBad、Baxのタンパク質発現量には変化を認めなかったため、apoptosisにはこれらのタンパク質以外の経路が関与していると考えられた。2. 8;21転座を有する急性骨髄性白血病モデルマウスの作成急性骨髄性白血病モデルマウス作成を目的として我々はヒトGM-CSFトランスジェニックSCIDマウスを開発し、当教室で開発したレチノイン酸耐性急性前骨髄球性白血病(APL)細胞株UF-1を用いてN生のモデルマウスを作成した。現在、このトランスジェニックマウスに対し8;21転座を有する骨髄性白血病細胞株Kasumi-1、SKNO-1、患者末梢血あるいは骨髄血由来の白血病細胞を移植し8;21転座を有する急性骨髄性白血病のモデルマウスの作成を行っている。また併せて患者末梢血あるいは骨髄血由来の白血病細胞から8;21転座を有する骨髄性白血病細胞株の作成も試みている。今後モデルマウスの作成が完了次第リボザイム発現ベクターを用いてin vivoにおけるAML1/MTG8リボザイムの効果を解析し、実際の臨床応用への検討を行う。

In this study, 8 There is a special diagnosis of acute osteoblastic leukemia in 21. The causes and causes of acute osteoblastic leukemia (AML) have been investigated. AML1/MTG8 is often fused with the cell colonization inhibition mechanism of acute osteoblastic leukemia. it has been established that the target is used in the international market. 1. 8: 21 the inhibition mechanism of molecular biology of leukemia cell cycle has been established. The results of last year's AML1/MTG8 experiment showed that the results of last year showed that there was a significant difference between apoptosis suppression and molecular biology in terms of cell cycle and molecular biology. Apoptosis was used to determine the presence of leukemic cell line, Kasumi-1 cell strain, Kasumi-1 cell strain, and time-sensitive apoptosis protein assay, which was confirmed by PCR. Bcl-2

项目成果

Ueno H.,et al: "A novel retinoic acid receptor(RAR)-selective antagonist inhibits differentiation and apoptosis of HL-60 cells:implications of RARα-mediated signals in myeloid leukemic cells." Leukemia Research. Vol22. 517-525 (1998)

Ueno H. 等人：“一种新型视黄酸受体 (RAR) 选择性拮抗剂抑制 HL-60 细胞的分化和凋亡：RARα 介导的信号对骨髓白血病细胞的影响。”（第 517-525 卷） 1998）

Matsushita H.,et al: "Induction of apoptosis in myeloid leukaemic cells by ribozymes targeted against AML1/MTG8." British Journal of Cancer. (in press).

Matsushita H. 等人：“针对 AML1/MTG8 的核酶诱导骨髓性白血病细胞凋亡。”

Matsushita H.,et al: "Restoration of retinoid sensitivity by MDR1 ribozymes in retinoic acid-resistant myeloid leukemic cells." Blood. Vol91. 2452-2458 (1998)

Matsushita H.等人：“在抗视黄酸的骨髓白血病细胞中通过 MDR1 核酶恢复类视黄醇敏感性。”

松下 弘道ら: "リボザイムによる白血病治療" 臨床血液. 39巻. 553-564 (1998)

Hiromichi Matsushita 等人：“使用核酶治疗白血病”，《临床血液学》第 39 卷，553-564 (1998)。

Scanlon K.J.: "Methods in molecular medicine,Vol.11:Therapeutic application of ribozymes" Humana Press Inc, 18 (1998)

Scanlon K.J.：“分子医学方法，第 11 卷：核酶的治疗应用”Humana Press Inc，18 (1998)