ヒト・メサンギウム細胞におけるAGE受容体(RAGE)の機能と発現調整の検討

人系膜细胞 AGE 受体 (RAGE) 的功能和表达调控的研究

• 批准号: 09770849
• 负责人: 山路 安義
• 金额: $ 1.41万
• 依托单位: Keio University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 1998
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09770849/
• 关键词: メサンギウム細胞; AGE受容体; 糖尿病

TKpromoterの上流にNFKB結合部位を6箇所有するルシフェラーゼ・リポータープラスミドを用いたNFKBの活性化の検討で、wild typeのHepG2細胞ではAGE-BSAによりNFKBの活性化は認められなかったが、h-RAGE発現ベクターによりh-RAGEを発現させるとAGE-BSAによるNFKBの活性化を認めるようになった。この結果はAGE-BSAがh-RAGEを介しNFKBを活性化する可能性を強く示唆するものであり、h-RAGEがAGE-BSAの機能的な受容体であることが初めて示された。ヒトメサンギウム細胞における検討では、NFKBの典型的な活性化因子であるTNFαによりNFKBのサブユニットの一つp65の著しい核内移行を示した。一方、リポータープラスミドを用いた検討では、プラスミドの導入量が少ない時はNFKBの活性化は2倍程度にすぎなかったが、プラスミドの導入量が閾値をすぎて増加すると活性化の程度が著しく増加した。ヒトメサンギウム細胞では、NFKBのサブユニットのひとつp50は非刺激状態でも核内に存在するため、新たに活性化されたNFKBが核内に移行してもNFKBの結合部位に結合できないために活性化が起こりにくいが、リポータープラスミドの過剰状態となると、freeのNFKB結合部位が出現するため新たに核内移行したp65による転写活性の上昇が明らかとなることが示唆された。以上の検討から、より生理的条件に近いと考えられる、リポータープラスミドの導入量を制限した状態で検討を行ったところ、AGE-BSAはTNFαと同程度に約2倍にNFKBを活性化した。一方、p65の核内移行はAGE-BSAでは明らかではなかった。以上より、AGE-BSAによるNFKBの活性化は従来しられているNFKBの活性化の機序と異なることが示唆された。

NFKB binding sites in the upstream of the TKpromoter are identified in six different ways: AGE-BSA, h-RAGE, AGE-BSA and NFKB activation in HepG2 cells of wild type. The results showed that AGE-BSA and h-RAGE could be involved in the activation of NFKB, and h-RAGE could be the functional receptor of AGE-BSA. The typical activation factor of NFKB, TNFα, is found in NFKB cells. The expression of p65 in NFKB cells is also shown in this study. When the amount of NFKB introduced is less, the degree of NFKB activation is doubled. When the threshold value of NFKB introduced is increased, the degree of NFKB activation increases. NFKB is activated in the nucleus in the non-stimulated state. NFKB is activated in the nucleus in the non-stimulated state. NFKB is activated in the non-stimulated state. Free NFKB binding sites appear to be new to nuclear migration p65 and increase in writing activity. In the above physiological conditions, AGE-BSA activates NFKB to about 2-fold the same extent as TNFα. One side, p65 and nuclear migration AGE-BSA The activation of NFKB in AGE-BSA is different from the activation of NFKB in the above.