悪性腫瘍血管内皮浸潤調節機構の物質的基盤と転移の臓器特異性

恶性肿瘤血管内皮侵袭及转移器官特异性调控机制的物质基础

• 批准号: 09771082
• 负责人: 遊道 和雄
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: Toyama Medical and Pharmaceutical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 1998
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09771082/
• 关键词: 血管内皮細胞; 浸潤; 転移; 接着分子; 線維肉腫; 血管内皮開裂因子; 血管内皮透過性; サイトカイン; 腫瘍浸潤

高転移性ヒト線維肉腫株HT1080細胞(3×10^6個)をヌードマウス皮下に移植後4週目に解剖し、原発腫瘍、転移腫瘍および正常肺、肝、脳組織を採取、各組織を細切しコラゲナーゼ酵素処理によりフローサイトメトリーを用いて血管内皮細胞を分離樹立した。これら各組織由来内皮細胞およびHT1080細胞表面に発現する細胞接着分子をフローサイトメトリーにより分析したところ、各内皮細胞にはICAM-1とELAM-1の高度発現、HT1080細胞膜上にはCD15とVLA-4の発現を認めた。特に、ELAM-1の発現はマウス肺由来の内皮細胞においてより顕著であった。各種接着分子モノクローナル抗体を用いた腫瘍-内皮細胞接着阻害実験によりHT1080細胞と各内皮細胞間の接着にはCD15/ELAM-1接着分子機構が重要であることが明らかとなった。これにより、各組織由来内皮細胞におけるCD15/ELAM-1接着分子発現レベルと転移の臓器特異性との関連が示唆された。また、HT1080細胞の産生するサイトカイン(IL-1α,IL-6)が内皮細胞上にELAM-1の発現を誘導することが確認され、各種接着分子抗体や抗サイトカイン抗体負荷による転移抑制実験のための基礎的データーが得られた。また、CD15/ELAM-1接着分子を介するHT1080細胞のHUVECへの接着がHUVECからのNO産生を誘導すること、さらにNOが内皮細胞間隙開裂と内皮浸潤の増強作用を有することを確認した。本研究から、内皮細胞の産生するNOによる内皮浸潤能の増強は、細胞運動能と増殖能への影響によるものではなく、内皮細胞間隙開裂の亢進によるものと推察された。

HT-1080 cells (3×10^6 cells) were transplanted subcutaneously and dissected 4 weeks after transplantation. The original tumor, transplanted tumor, and normal lung, liver, and lung tissues were collected. Each tissue was dissected and treated with enzyme. Vascular endothelial cells were isolated and established. The expression of ICAM-1 and ELAM-1 in endothelial cells and the expression of CD15 and VLA-4 in HT1080 cells were analyzed. The development of ELAM-1 in lung tissue Various adhesion molecules CD15/ELAM-1 adhesion molecules are important for tumor cell adhesion inhibition in HT1080 cells and adhesion between endothelial cells CD15/ELAM-1 is derived from endothelial cells in various tissues, and is subsequently associated with molecular development, migration, and organ-specificity. The production of ELAM-1 in HT-1080 cells and its induction by IL-1α,IL-6 were confirmed. The basic mechanism for the inhibition of migration was established by various molecular antibodies and anti-ELAM antibody load. CD15/ELAM-1 adhesion molecule mediates the induction of NO production in HUVEC cells and the enhancement of endothelial cell gap cleavage and endothelial infiltration by NO in HT1080 cells. This study aims to investigate the effects of NO production, endothelial infiltration, cell motility and proliferation on endothelial cell gap cleavage.

项目成果

Kovacs MS,Yudoh K.et al.: "Stable translocations detected by fluorescence in situ hybridization: a rapid surrogate end point to evaluate the efficacy of a potentiator of tumor response to radiotherapy." Cancer Research. 57. :672-677 (1997)

Kovacs MS，Yudoh K.等人：“通过荧光原位杂交检测到的稳定易位：评估肿瘤放疗反应增强剂功效的快速替代终点。”

Yudoh K.et al.: "Nitric oxide induced by tumor cells activates tumor cell adhesion to endothelial cells and permeability of the endothelium in vitro" Clinical and Experimental Metastasis. 15. 557-567 (1997)

Yudoh K.等人：“肿瘤细胞诱导的一氧化氮在体外激活肿瘤细胞与内皮细胞的粘附和内皮细胞的通透性”临床和实验转移。

Evans JW,Yudoh K,et al.: "Tirapazamine is metabolized to its DNA-damaging radical by intranuclear enzymes." Cancer Research. 58. 2098-2101 (1998)

Evans JW、Yudoh K 等人：“替拉扎明通过核内酶代谢为其 DNA 损伤自由基。”

Yudoh K.et al.: "1α,25-dihydroxyvitamin D3 inhibits the in vitro invasiveness through the extracellular matrix and in vivo pulmonary metastasis of B16 mouse melanoma." Journal of Laboratory & Clinical Medicine. 133. 120-128 (1999)

Yudoh K. 等人：“1α,25-二羟基维生素 D3 通过细胞外基质抑制 B16 小鼠黑色素瘤的体外侵袭性和体内肺转移。”《实验室与临床医学杂志》133. 120-128 (1999)。