多核巨細胞形成におけるサイトカイン及び接着分子の役割

细胞因子和粘附分子在多核巨细胞形成中的作用

基本信息

项目摘要

1、 多核巨細胞のcDNAライブラリーの構築:linker primer法を用いてcDNAを合成、pSPORT1 plasmid vecterをelectroporationにてJM109へ導入し、dDNAライブラリーを構築した。2、 多核巨細胞で特異的に高発現している遺伝子の同定:(1) differential hybidization多核巨細胞とMφのcDNAをそれぞれprobeとして、上記のライブラリーをスクリーニングした.これまでのところ多核巨細胞のprobeと特異的にハイプリダイズするクローンは検出されなかった。mRNA発現量の差が少なく、検出されなかった可能性も考えられた。(2)differential dispiay多核巨細胞の形成過程でmRNAを抽出し、蛍光ラベルoligo dT primerで逆転写反応を行い、'5 arbitarilyprimerでPCRを行った。変性アクリルアミドゲル電気泳動し、多核巨細胞形成過程で発現してきたバンドを切り出し、TA cloningを行った。これまでのところシークエンスされたものは、データベースの検索によりIL-6、MMP-9、fusion regulatory protein-1である。Northem blottingで確認すると同時に、さらに新たなバンドを検出、今後もクローニングを進める予定である。
1. Construction of cDNA fragments of multinucleated giant cells: cDNA synthesis by linker primer method, JM109 introduction by pSPORT1 plasmid vector, construction of DNA fragments. 2. Polynuclear giant cells are characterized by specific high expression of Mφ cDNA:(1) differential hybridization Polynuclear giant cells and Mφ cDNA are characterized by high expression of Mφ cDNA and high expression of M φ cDNA. The probe of this polynuclear giant cell is specific to the cell. The difference in mRNA expression is small, and the probability of detection is small. (2) mRNA extraction, reverse transcription of oligo dT primer and PCR of '5 arbitrary primer during the formation of differential dispiay multinucleated giant cells. In the process of polynuclear giant cell formation, the development of polynuclear giant cells and the development of TA cloning are discussed. These include IL-6, MMP-9 and fusion regulatory protein-1. Northem blotting is confirmed at the same time, at the same time.

项目成果

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南雲 剛史: "骨巨細胞腫のにおけるサイトカインの役割" 日本整形外科学会誌. 71巻8号. S1741-S1741 (1997)
Takeshi Nagumo:“细胞因子在骨巨细胞瘤中的作用”日本骨科学会杂志,第 71 卷,第 8 期。S1741-S1741 (1997)
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南雲 剛史: "骨巨細胞腫の骨吸収及び多核巨細胞形成におけるサイトカインの役割" 日本整形外科学会誌. 71巻6号. S1054-S1054 (1997)
Takeshi Nagumo:“骨巨细胞瘤中细胞因子在骨吸收和多核巨细胞形成中的作用”日本骨科学会杂志,第 71 卷,第 6 期。S1054-S1054(1997 年)。
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