骨巨細胞腫の多核巨細胞形成及び骨破壊におけるサイトカインの役割

细胞因子在骨巨细胞瘤中多核巨细胞形成和骨破坏中的作用

• 批准号: 07771176
• 负责人: 南雲 剛史
• 金额: $ 0.7万
• 依托单位: Keio University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07771176/
• 关键词: 骨巨細胞腫; サイトカイン; 多核巨細胞; 骨吸収

1、骨巨細胞腫培養細胞の産生するサイトカイン:手術時に採取した骨巨細胞腫(計7例)をcollagenaseを用いて分散し、10%FBS加RPMI1640培地にて培養した。初代培養細胞、継代培養細胞(2X10^5個/ml)の培養上清中のIL-1β、TNFα、M-CSFをELISA法により測定した。初代培養液中のIL-1βは62.5pg/ml、M-CSFは31.3pg/mlであった。現在、IL-4をELISA法で測定中である。2、骨巨細胞腫の骨破壊機序:骨巨細胞腫よりtotal RNAを抽出し、northern blottingによりMMP-1、MMP-2、MMP-3、MMP-9のmRNAの発現を検討したところ、破骨細胞と同じようにMMP-9のメッセージの発現を認め、骨破壊機序に関わっている可能性を示唆した。今後、western blotting及びsubstrate gel上での電気泳動によるzymographyを行う予定である。3、多核巨細胞の形成:ヒト末梢血単球を付着法により分離、IL-4(100u/ml)及びM-CSF(10000u/ml)を添加し、2日間培養することにより多数の多核巨細胞が形成された。一方、過去に報告されたIL-3とIFNγの系については、我々の条件下では多核巨細胞を形成することはできなかった。現在、骨巨細胞腫の培養上清を末梢血単球の培養系へ添加し、多核巨細胞の形成を観察中である。そしてその際のM-CSFの役割について中和抗体を用いて検討する予定である。

1, bone giant cell culture cell swollen の produce す る サ イ ト カ イ ン : surgery に take し た bone giant cell swelling (7 cases) を collagenase を with い て dispersion し, 10% FBS and RPMI1640 petty に て cultivate し た. <s:1> determination of <s:1> IL-1β, TNFα and M-CSF in the <s:1> culture supernatant of primary culture cells and 継 generation culture cells (2X10^5 cells /ml) by をELISA method によ を た. In the primary culture medium, <s:1> IL-1β <s:1> 62.5pg/ml and M-CSF <s:1> 31.3pg/mlであった. Now, in the determination of IL-4 by をELISA で, である. 2. Bone rupture in giant cell tumor of bone 壊 sequence: giant cell tumor of bone よ よ total RNAを extraction of <s:1> and northern Blotting に よ り MMP 1, MMP - 2 and MMP - 3, MMP - 9 の mRNA の 発 を now beg し 検 た と こ ろ, osteoclasts と じ よ う に MMP - 9 の メ ッ セ ー ジ の 発 を now recognize め, bone broken 壊 machine sequence に masato わ っ て い を る possibility in stopping し た. In the future, western blotting and で <s:1> electrokinetic によるzymography on びsubstrate gel will be う determined である. 3, multinucleated giant cells の formed: ヒ 単 ball を ト peripheral blood to pay the method に よ り separation, IL - 4 (100 u/ml) and び M - CSF (10000 u/ml) を add し, 2 day training す る こ と に よ り most の multinucleated giant cells が form さ れ た. One party, the past に report さ れ た IL - 3 と IFN gamma の is に つ い て は, I 々 の conditions で は multinucleated giant cells を form す る こ と は で き な か っ た. Now, the supernatant of bone giant cell tumor culture is を, the peripheral blood is 単, the bulb culture line is へ, and the nuclei of multinucleated giant cell tumors are added to form を観 observation である. Youdaoplaceholder0 てそ てそ てそ てそ <s:1> the neutralizing antibody を is determined by する て検 て検 する て て て neutralizing antibody を.