遺伝子治療を併用した緑内障濾過手術の開発

青光眼滤过手术联合基因治疗的进展

• 批准号: 09771463
• 负责人: 雑賀 司珠也
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Wakayama Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 1998
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09771463/
• 关键词: テノン嚢線維芽細胞; トランスフォーミング成長因子β; コラーゲン; 細胞外マトリックス; 創傷治癒; 瘢痕化; 緑内障手術; マトリックスメタロプロテアーゼ

本研究では、トランスフォーミング成長因子β1(以下TGFβ1)の発現をアンチセンスデオキシオリゴヌクレオチド(以下ASDON)で抑制することにより、緑内障濾過手術後の過剰な瘢痕化を抑制し、その手術予後を改善することを目的とした。本年度は、培養細胞による実験を中心に、一部、病理組織による研究も行った。培養ヒト眼テノン嚢線維芽細胞は、TGFβ1非添加でも、基礎的分泌としての結合組織産生が確認されたので、この基礎分泌を、TGFβ1ASDONで、抑制することは困難との結論を得た。そこで、TGFβ1による培養嚢線維芽細胞の細胞外マトリックス代謝の変化を検討し、細胞外へのコラーゲン、ファイブロネクチンの亢進と細胞層への沈着増加を確認し、同時に基底膜成分ラミンンは影響されないことを見いだした(投稿中)。予備実験として、結合組織成分を転写レベルで抑制するγインターフェロンをTGFβ1刺激細胞に添加すると、コントロールレベル以下にまで、結合組織産生を抑制したことから(投稿中)、同刺激細胞を培養条件下での創傷モデルとして使用し、次年度の研究に入る。一方、眼結膜局所の瘢痕化での結合組織代謝を研究する目的で、ヒト臨床材料や動物眼を用いて結合組織成分、TGFβ1などの成長因子、マトリックスメタロプロテアーゼ(MMP)を標的として、病理組織標本による免疫組織化学、in situハイブリダイゼイションを行った。結合組織代謝、成長因子発現の亢進を確認し、うち、MMPの発現亢進を報告した。以上のように、この結合組織代謝の亢進には、TGFβ1の発現亢進が関与していると考えられた。次年度の動物眼で結膜下瘢痕へのTGFβ1ASDON実験のための基礎データを得た。

This study aims to suppress the expression of TGF β1(hereinafter TGFβ1) after cataract filtration surgery and to improve the scar formation after cataract surgery. This year, the Department of Pathology conducted research on cultured cells. In vitro cultured human embryonic cells, TGFβ1 was not added, basal secretion and binding tissue production were confirmed, basal secretion and TGFβ 1 ASDON were inhibited. In addition, TGFβ1-induced extracellular metabolism of cultured embryonic cells was investigated, and the effects of extracellular growth, hyperregulation of extracellular growth, and increase of cell layer deposition were confirmed. In preparation for this study, the inhibition of γ-ray growth in TGF-β1-stimulated cells was determined by combining tissue components, adding TGF-β1 to TGF-β1-stimulated cells, and the inhibition of combined tissue production was determined by combining tissue components with TGF-β 1 (submission under way). The inhibition of wound growth under culture conditions with TGF-β 1-stimulated cells was studied in the next year. Objective: To study the combination of tissue metabolism and scarring in ocular conjunctiva. Objective: To study the combination of tissue components, TGFβ1, growth factor, MMP, immunohistochemistry, in situ hybridization and in situ hybridization. Combined with tissue metabolism, growth factor production hyperactivity confirmation, MMP production hyperactivity report The above factors are related to the hyperactivity of tissue metabolism and the hyperactivity of TGFβ1. In the following year, the animal eyes were covered with subconjunctival scars and TGFβ1ASDON was obtained.

项目成果

Saika S,et al: "Recombinant TIMP enhances the prolifeartion of rabbit corneal epithelial cells in vitro and the spreading of rabbit corneal epithelium in situ" Curr.Eye Res.in press.

Saika S 等人：“重组 TIMP 增强兔角膜上皮细胞的体外增殖和原位兔角膜上皮的扩散”Curr.Eye Res.in press。

Saika S.: "Corneal healing responses to injuries and refractive surgeries." Kulgar Publications BV, Amsterdam, The Netherlands (in press),

Saika S.：“角膜对损伤和屈光手术的愈合反应。”

Saika S,et al: "In vitro effects of doxorubicin and mytomycin C on human Tenon's capsule fibroblasts" Ophthalmic Res.29. 91-102 (1997)

Saika S 等人：“阿霉素和丝裂霉素 C 对人特农氏囊成纤维细胞的体外影响”眼科 Res.29。

Kawashima Y,Saika S,et al: "Immunolocalization of matrix metalloproteinases and tissue inhibitors of metalloproteinases in human subconjunctival fibroblasts" Curr.Eye Res.(in press).

Kawashima Y、Saika S 等人：“人结膜下成纤维细胞中基质金属蛋白酶和金属蛋白酶组织抑制剂的免疫定位”Curr.Eye Res.（出版中）。