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ミトコンドリアに特徴的なリン脂質の生合成と機能の遺伝生化学的研究

线粒体特征磷脂的生物合成和功能的遗传学和生化研究

基本信息

批准号：
09772019
负责人：
川崎清史
金额：
$ 1.15万
依托单位：
National Institute of Infectious Diseases
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1997
资助国家：
日本
起止时间：
1997 至 1998
项目状态：
已结题

项目摘要

CHO細胞からホスファチジルグリセロリン酸(PGP)合成酵素をコードするcDNAを酵母のPGP合成酵素との類似性を基にして単離した。単離されたcDNAは553残基のアミノ酸からなるペプチドをコードしており計算上の分子量は62、329Da、酵母の酵素との相同性は34%であった。このcDNAを導入して一過的に発現させたCHO細胞ではコントロールベクターを導入した株と比べてPGP合成酵素の比活性が約15倍上昇した。我々が昨年度CHO細胞から精製しているPGP合成酵素の分子量とクローニングしたcDNAのコードする蛋白質のサイズはほぼ一致し、さらにcDNAがコードする蛋白質に対して作製した抗体が精製蛋白とも反応することからこのcDNAがPGP合成酵素をコードすると考えられる。さらにCHO細胞PGP合成酵素温度感受性変異株(PGS一S株)にcDNAを導入して安定して発現する株(PGS-S/cPGS1株)を得た。PGS-S/cPGS1株では変異株のPG合成速度の低下が野性株以上に回復し、その結果PG及びCL含量が野生株以上に回復していた。さらに、PGS-S/cPGS1株は変異株の細胞増殖速度の低下が野生株並に回復しており、また変異株のミトコンドリアの形態異常からも回復していた。以上のことからPGP合成酵素がミトコンドリアの形態と機能に重要であることが示された。

CHO biosynthetic enzyme (PGP) synthetic enzyme PGP synthetic enzyme PGP biosynthetic enzyme similarity base enzyme isolated from yeast. The molecular weight (MWM) 62, 329Da, yeast enzyme, homology, 34% homology were calculated. The specific activity of cDNA synthase was about 15 times higher than that of PGP synthesis enzyme. The results showed that the specific activity of PGP synthetic enzyme was 15 times higher than that of PGP synthetic enzyme. Last year, we used CHO cells to determine the molecular weight of PGP synthesis enzymes, molecular weights, cDNA enzymes, proteins, antibodies, antibodies, proteins, cDNA enzymes, PGP enzymes, enzymes. The temperature sensitive strain (PGS-S strain) of PGP biosynthesis enzyme in CHO cells was transformed into diazepam (PGS-S/cPGS1 strain). The PG synthesis rate of PGS-S/cPGS1 strains was lower than that of wild plants, and the results of PG and CL content of wild plants were lower than those of wild plants. The colonization rate of the wild plants was lower than that of the wild plants, and the morphology of the wild plants was lower than that of the wild plants. The growth rate of the wild plants was lower than that of the wild plants, and the morphology of the wild plants was very low. The above-mentioned PGP synthesis enzymes can be used to display important information on the shape of the machine.