デオキシオキザノシンの生成を経由する新規発ガン機構の分光学的研究

通过脱氧氧核苷产生的新型致癌机制的光谱研究

• 批准号: 09780545
• 负责人: 金折 賢二
• 金额: $ 1.54万
• 依托单位: Kyoto Institute of Technology
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 1998
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09780545/
• 关键词: DNA損傷; デオキシオキザノシン; 亜硝酸; 一酸化窒素; 円二色性分光法

デオキシグアノシン(dGuo)を亜硝酸または一酸化窒素処理することにより生成するデオキシオキザノシン(dOxo)は新規のDNA損傷であり、そのdOxoを経由する新規発ガン機構を解明するために研究を行った。平成10年度の研究実績を以下に述べる。2'-deoxyoxanosine 5'-triphosphate(dOTP)をdGTPを亜硝酸処理することによって準備し、dOTPがDNAポリメラーゼの基質となってどの程度DNA鎖への取り込まれるか調べた。まず、三種類の天然型ヌクレオチドとdOTPの存在下で、M13mp18 DNAを大腸菌のDNAポリメラーゼIクレノーフラグメント(PolIKf)によって複製することによって、dOTPが天然型のどの塩基の代わりに取り込まれるかを調べた。dOTPは主にdGTPの代わりにDNA中に取り込まれ、いくらかの割合でdATPの代わりにも取り込まれた。dGTPの亜硝酸または一酸化窒素処理によって生じる主生成物である2'-deoxyxanthosine5'-triphosphate(dXTP)は、全くdATPの代わりに取り込まれなかったため、dOTPの変異源性はdXTPよりかなり高いことが示唆された。同様の結果は、3'-5'エキソヌクレアーゼ欠損のT7DNAポリメラーゼによる取り込み実験でも示された。次に、dOTPとdXTPがC及び、Tの向かいにPolIKf(exo-)によって取り込まれる頻度をdGTPと比較した。dOTPとdXTPがCの向かいに取り込まれる頻度はdGTPよりもずっと低かった。Tの向かいには、dOTPは、dGTPより1.6〜3.9倍高い頻度で取り込まれたのに対し、dXTPは全く取り込まれなかった。以上の実験事実は、dOTPが生体内に生成し、細胞内のヌクレオチドプールに存在すると突然変異の頻度は高くなることが示唆された。

The DNA damage caused by nitric acid treatment was investigated. The research results of Heisei 10 are described below. 2'-deoxyxanthine 5'-triphosphate(dOTP) is prepared by dGTP nitric acid treatment, and dOTP is used for DNA sequencing. In the presence of three kinds of natural forms of DTP, M13 mp18 DNA, DNA of Escherichia coli, DTP, DTP dOTP is the host of dGTP and DNA. The main product of dGTP is 2'-deoxyxanthine 5'-triphosphate(dXTP), which is produced by nitric acid treatment. The same results were obtained for the T7DNA fragment, 3'-5' and 4 '-5'-5 '-5'-5 'and 4'-5 '-5' respectively. Second, dOTP, dXTP, C, T, D, D. dOTP T is 1.6 ~ 3.9 times more frequent than dOTP, dXTP and dXTP. The above facts are true, dOTP is produced in vivo, and there is a sudden change in the frequency of occurrence in cells.

项目成果

Toshinori Suzuki: "Misincorporation of 2'-Deoxyoxanosine 5'-Triphosphate by DNA Polymerases and Its Implication for Mutagenesis" Biochemistry. 37・33. 11592-11598 (1998)

Toshinori Suzuki：“DNA 聚合酶错误掺入 2-脱氧氧核苷 5-三磷酸及其对诱变的影响”生物化学 37・33（1998）。

Kenji Kanaori: "Two Four-Stranded Structures of d(CnT) in Solution by ^1H NMR" Nucleic Acids Symposium Series. 39. 127-128 (1998)

Kenji Kanaori：“通过 ^1H NMR 测定溶液中 d(CnT) 的两个四链结构”核酸研讨会系列。

Toshinori Suzuki: "Deglycosylation Susceptibility and Base-pairing Stability of 2'-Deoxyoxanosine in Oligodeoxynucleotide" The Japanese Journal of pharmacology. 75・1. 67-67 (1997)

Toshinori Suzuki：“寡脱氧核苷酸中2-脱氧氧核苷的去糖基化敏感性和碱基配对稳定性”日本药理学杂志75・1（1997）。

Kenji Kanaori: "^1H Nuclear Nagnetic Resonance Stydy on Equilibrium between Two Four-Stranded Solution Conformations of Short d(CnT)" Biochemistry. 37・37. 12979-12986 (1998)

Kenji Kanaori：“^1H 短 d(CnT) 的四链溶液构象之间的平衡的核磁共振研究”生物化学 37・37（1998）。

Toshinori Suzuki: "products in the reaction of 2'-Deoxyoxanosine with NO in the presence and absence of O_2" Nucleic Acids Symposium Series. 39. 177-178 (1998)

Toshinori Suzuki：“2-脱氧氧核苷与 NO 在存在和不存在 O_2 的情况下反应的产物”核酸研讨会系列。