質量分析と磁気共鳴法を用いた食品抗酸化活性の新規評価法の確立

利用质谱和磁共振建立食品抗氧化活性评价新方法

• 批准号: 22K05474
• 负责人: 金折 賢二
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Kyoto Institute of Technology
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2026-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K05474/
• 关键词: 抗酸化活性; 構造同定; 食品; 磁気共鳴; 質量分析

HPLC-ESRで示される抗酸化活性の各ピーク中に含まれる化合物を質量分析法（MS）と核磁気共鳴（NMR）法で決定し、さらに、HPLC-MSシステムを構築して各ピーク中の抗酸化物質を確定する。それらの結果をもとに、抗酸化活性予測システムを構築し、応用研究をとおして検証して汎用性を確認することが目標である。2022年度においては、以下の①～③の実験について研究を進めた。①　10種類程度の代表的な野菜の水溶性成分と脂溶性成分を分別して、水溶性部分についてスーパーオキシドラジカルに対してのHPLC-ESR測定を実施した。三次元クロマトグラフィーを用いて紫外-可視(UV-VIS)スペクトルを同時測定しながら抗酸化物質を分取して、MSとNMRを用いて構造同定をすすめた。植物由来の食品の試料溶液から、HPLCからの溶出物を固相抽出、濃縮してNMRで同定し、複数のアミノ酸および核酸ヌクレオシドを同定した。また、質量分析器に接続するために、酢酸アンモニウムでの分離条件を検討した。②　フラボノイド配糖体やアントシアニンは代表的な抗酸化物質であり、これらを検出し抗酸化活性を評価することは必要である。アントシアニンを豊富に含む紅芋を試料として用いて分離検出条件を検討し、それらのHPLC-ESR測定を実施した。③　脂溶性部分に含まれる抗酸化活性物質の研究を進めるために、タマネギに含まれる、強い抗酸化物質であるケルセチン誘導体のジメチルスルホキシド中での抗酸化反応の検出および、カテコール部位に生じるラジカル消去活性機構について明らかにした。

由HPLC-ESR显示的抗氧化活性的每个峰中包含的化合物由质谱法（MS）和核磁共振（NMR）方法确定，并进一步构建HPLC-MS系统以确定每个峰中的抗氧化剂。基于这些结果，目标是构建抗氧化活性预测系统，并通过应用研究来验证其多功能性。在2022年，对以下实验进行了研究。 1）分离大约10种典型蔬菜的水溶性和脂溶性成分，并在超氧化物自由基的水溶液部分进行HPLC-ESR测量。同时使用三维色谱法收集抗氧化剂，同时测量紫外线可见（UV-VIS）光谱，并建议使用MS和NMR进行结构鉴定。从植物来源的食物的样品溶液中，将HPLC的洗脱液萃取，浓缩和NMR鉴定，以鉴定多种氨基酸和核酸核苷。另外，检查了乙酸铵的分离条件，以连接到质谱仪。 ②类黄酮糖苷和花色苷是代表性的抗氧化剂，有必要检测并评估它们的抗氧化活性。使用富含花青素的红土豆作为样品检查了分离和检测条件，并进行了HPLC-ESR测量。 ③为了进步对脂溶性部分中包含的抗氧化活性物质的研究，我们已经阐明了二甲基亚氧化二甲基亚氧化物（洋葱中发现的强抗氧化物质）的抗氧化反应的检测以及发生在稳态部位的自由基消除活性的机理。

项目成果

Stopped-flow-optical Absorption and -ESR Detection of Rutin (Quercetin-3-O-rutinoside) B-ring Catechol Aroxyl Radicals Generated during Redox Reaction between Rutin and superoxide Radical in DMSO

芦丁 (Quercetin-3-O-rutinoside) B 环儿茶酚芳氧基自由基的停流光学吸收和 ESR 检测是在 DMSO 中芦丁与超氧化物自由基之间的氧化还原反应中产生的

• DOI: 10.1246/cl.220009
• 发表时间: 2022
• 期刊: Chemistry Letters
• 影响因子: 1.6
• 作者: Kuwabara;Keiko; Nishio;Natsuki; Nakano;Ryota; Sakurai;Yasuhiro; Yamaguchi;Tomoko; Miyake;Yusuke; Kanaori;Kenji; Tajima;Kunihiko
• 通讯作者: Kunihiko