アポトーシス抑制能を有する新しいプロテアーゼ抑制遺伝子のクローニング

具有凋亡抑制能力的新型蛋白酶抑制剂基因的克隆

• 批准号: 10770519
• 负责人: 田野崎 栄
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: National Institute of Radiological Sciences
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 2000
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-10770519/
• 关键词: アポトーシス; プロテアーゼインヒビター; 白血病細胞; calpastatin

同一白血病(FAB;M0)よりサイトカイン(IL3,SCF)依存性および自立性に増殖する白血病細胞2種類を樹立した。この2細胞の形態的は依存性細胞株では増殖するにもかかわらず全細胞の35%がアポトーシスの形態をとり死滅する。この2細胞間でmRNA発現程度に差がある遺伝子の同定をDifferential display(DD)法にて試み、自立性細胞に高発現を認めた遺伝子(R3-2)の一部(1.2kb)を同定しえた。このR3-2をプローブとして白血病細胞2種類につきNorthern法でも同様R3-2は自立性細胞に高発現(数100倍)を認めた。しかも、K562,HELおよびこの依存性細胞株はサイズが5.0kbであるが、自立性細胞株は4.5kbとサイズが変化していた。R3-2の一部(1.2kb)をホモロジー解析したところ、プロテアーゼインヒビターであるcalpastatinに62.3%ホモロジーを有していた。R3-2を既存のcalpastatinの塩基配列をもとにRT-PCRを行い塩基配列を随意時決定していったところ、一部エクソンがスプライシングアウトしているcalpastatinのアイソタイプであることがわかった。現在このcDNA全長をクローニングしており、このcalpastatinアイソタイプの機能をヒト白血病細胞K562,HL60等に遺伝子導入し、カゼイン蛋白分解活性抑制アポトーシスの比率などで検討中である。

The same leukemia (FAB;M0), leukemia, leukemia. The dependent cell line with the form of "2" cell, the cell line of the whole cell is 35%, the cell is dead. The difference in the degree of mRNA detection between the two cells was the same as that of the Differential display (DD) method and the 1.2kb of R3-2 was the same as that of R3-2. The number of R3-2 cells was 100 times higher than that of R3-2 cells. The cell lines of 4.5kb, K562, HEL and K562 were dependent and independent, respectively. The cell lines of 4.5kb, HEL, HEL, HEL, R3-2 "one" (1.2kb). Please tell me that there is a bad news. I need to know that there is a problem. I don't know if there is a problem. I don't know if there is a calpastatin. R3-2 when the existing calpastatin

项目成果

Inokuchi K,et al.: "Minimal residual disease in acute myelogenous leukemia with PML/RAR alpha or AMLl/ETO mRNA and phenotypic analysis of possible T and natural killer cells in bone marrow." Leukemia and Lymphoma. 29(5-6). 553-561 (1998)

Inokuchi K 等人：“具有 PML/RAR α 或 AML1/ETO mRNA 的急性髓性白血病的微小残留病以及骨髓中可能的 T 细胞和自然杀伤细胞的表型分析。”

Yamaguchi H.et al.: "Establishment of a near-triploid human B-cell lymphoma cell line with t(14 ; 18)and a p53 gene point mutation"British Journal of Haematology. 105(3). 764-767 (1999)

Yamaguchi H.等人：“具有t(14；18)和p53基因点突变的近三倍体人B细胞淋巴瘤细胞系的建立”英国血液学杂志。

Yasukawa M. et al.: "Analysis of HLA-DRB1 alleles in Japanese patients with chronic myelogenous leukemia"American Journal of Hematology. 63(2). 99-101 (2000)

Yasukawa M.等人：“日本慢性粒细胞白血病患者的HLA-DRB1等位基因分析”美国血液学杂志。

Sasajima K.et al.: "Thoracoscopic excision with mini-thoracotomy for a bronchogenic cyst of the esophagus"Hepatogastroenterology. 46(27). 1785-1787 (1999)

Sasajima K.等人：“胸腔镜切除术和小胸廓切开术治疗食管支气管囊肿”肝胃肠病学。

Tanosaki S,et al.: "Relation between microsatellite instability and N-ras mutation and duration of disease free survival in patients with acute leukemia." Cancer. 83(3). 475-481 (1998)

Tanosaki S 等人：“微卫星不稳定性与 N-ras 突变和急性白血病患者无病生存期之间的关系。”