創傷治癒、皮膚悪性腫瘍におけるBasonuclinの関与

Basonuclin 参与伤口愈合和皮肤恶性肿瘤

• 批准号: 10770984
• 负责人: 松崎 恭一
• 金额: $ 1.02万
• 依托单位: St. Marianna University School of Medicine
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1998 至 1999
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-10770984/
• 关键词: Basonuclin; 表皮細胞; 創傷治癒; Zinc finger; transcription factor; 増殖; 分化; zinc finger

Zinc finger proteinであるBasonuclinは、表皮のstem cellが存在するといわれている表皮基底細胞に存在することから、表皮細胞の増殖と分化に深く関与していると考えられている。ヒト組織でのみ研究が行われてきたBasonuclinが、創傷治癒にどのように関与しているかを本研究ではラットによる実験モデルで検討した。ラット背部に3×3cmの筋膜にいたる皮膚欠損創を作製した.皮膚欠損創はワゼリンガーゼで被覆し、その後健常部を含め皮膚欠損創を経時的に採取した。採取した検体はO.C.T.Compoundに入れ急速凍結した。凍結した検体を6μmに薄切後、アセトン:メタノールで固定した。固定した切片にrabbit polyclonal antibody to human Basonuclinを加えインキュベーションした。次いでbiotinylated goat antiserum to rabbit IgGとstreptavidin-Cy3を加え免疫染色した。また、DNAはHoechst33258で染色した。標本の観察は螢光顕微鏡を用いて行った。結果は正常皮膚と創縁皮膚との間でBasonuclinの局在に明らかな相違は認められなかった。今回の研究は光顕レベルによる検討であったが、今後は分子生物学手法も取り入れて検討してみたい。また、皮膚の創傷治癒は主に創の収縮と上皮化によって行われるが、Basonuclinは表皮の基底細胞とその直上の細胞で見られることから、創収縮の影響のない角膜潰瘍モデルを用いることによって創傷治癒の中でも特に上皮化への関与に焦点を絞り検討してみたい。

Basonuclin是一种锌指蛋白，在表皮基底细胞中发现了表皮干细胞存在，被认为与表皮细胞的增殖和分化深深相关。在这项研究中，我们研究了仅在人体组织中研究的basonuclin如何使用大鼠的实验模型参与伤口愈合。在大鼠的背面产生了3 x 3 cm的皮肤缺陷伤口。皮肤缺陷伤口被vauseling纱布覆盖，然后随着时间的推移收集了包括健康部位的皮肤缺陷伤口。样品在O.C.T.中迅速冷冻。化合物。冷冻试样切成6μm，然后用丙酮固定：甲醇。将兔多克隆抗体与人盆地核酸一度添加到固定切片中并孵育。接下来，将生物素化的山羊抗血清与兔IgG和链霉亲和素-CY3添加到免疫染色中。此外，将DNA用HOECHST33258染色。使用荧光显微镜观察样品。结果表明，正常皮肤和伤口皮肤之间的盆地定位没有明显差异。这项研究是在光显微镜水平上进行的，但我想将来通过结合分子生物学技术来考虑这一点。此外，皮肤中的伤口愈合主要是通过伤口收缩和上皮化进行的，但是在表皮和细胞的基底细胞中可以看到basonuclin，因此我们希望通过使用不影响伤口受伤的角膜溃疡模型来关注上皮化，尤其是在伤口愈合中的参与。