权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

甲状腺癌特異的遺伝子のSAGE法による検出と術前診断への応用

SAGE法检测甲状腺癌特异性基因及其在术前诊断中的应用

基本信息

批准号：
10771346
负责人：
高野徹
金额：
$ 1.34万
依托单位：
Osaka University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1998
资助国家：
日本
起止时间：
1998 至 1999
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-10771346/
关键词：
SAGE Thyroid Cancer mRNA Molecular-based Diagnosis thyroid Cancer Gen- Diagnosis

项目摘要

正常甲状腺組織、甲状腺濾胞腺腫、濾胞癌、乳頭癌、未分化癌各一例よりmRNAを精製し、ストレプトアビジンビーズの上でcDNAを合成した。制限酵素NIaIIIにて切断後3'側にリンカーを接続し、Tagging酵素でリンカー近辺で切断した。2種類の異なるリンカーで同じ操作をしたものを接続しDitagを作製した。NIaIIIにて切断後、ライゲーションしたものをベクターに組み込み、大腸菌に導入した。発生した各コロニーに対してプラスミドを精製し、塩基配列解析を行った。各組織に対して2500個以上のDitag(5000個以上のmRNAに相当)を解析し、解析プログラムを用いて遺伝子発現プロフィールを作製した。出現頻度の多い遺伝子群にはhouse keeping gene、リボゾーム、ミトコンドリアの遺伝子が多かった。分化型腫瘍ではサイログロブリンが高発現していた。癌組織の中ではフェリチン、β2ミクログロプリン等、すでに腫瘍マーカーとして知られている遺伝子が高発現していた。未分化癌ではオステオネクチン、αチューブリンが高発現していた。これらの遺伝子は未分化癌の分子診断法の開発に役立つものと考えられる。またこの検討で濾胞癌で高発現しているが、濾胞腺腫で発現の認められない遺伝子が未知のものも含めて7個見つかった。現在、多数例の腫瘍組織を対象にRT-PCR、in situhybridizationにてこれらの遺伝子の特異性を検討すると同時に、未知の遺伝子については全長の配列の解析を行っている。

One case of normal thyroid tissue, one case of thyroid adenocarcinoma, one case of mRNA cell carcinoma, one case of breast cancer, one case of undifferentiated carcinoma, one case of normal thyroid tissue, one case of thyroid adenocarcinoma, one case of normal thyroid tissue, one case of thyroid carcinoma, one case of breast cancer, one case of undifferentiated carcinoma, one case of normal thyroid tissue, one case of thyroid adenocarcinoma, one case of breast cancer and one case of undifferentiated carcinoma. After the restriction enzyme NIaIII was cut off, 3', 5', 3', 5', 3', 5', 5', 5', 5', 3', 3', 3', 3', 3', 3', 3', 3', 3', 3', 5', 3', 3', 3', 3', 3', 3', 3', 3', 3', 3', 3', 3', 5', 3', 3', 3', 3', 3', 3', 3', 3', 3', 3', 3', 3', 3', 3', 3', 3', 3', 3', 3', 3', 3', 3', 3', 3', 3', 3', 3', 3', 3', 3', 3' 2. The same operation should be done in the same way. The Ditag will be connected to each other. After the NIaIII was cut off, the bacteria were cut off, and the bacteria were introduced. This is a good example of how to make sure that you can analyze the rows in the base column. Each organization examines more than 2500 Ditag (more than 5000 mRNA are equivalent) to parse and parse the data. Use the database to realize that the users are registered as users. It is found that the sub-group of the multi-cluster is full of house keeping gene, sub-group and sub-group. The differentiation type is different from each other. In the cancer tissue, the expression of β _ 2-β _ 2, β _ 2, β _ 2, β _ 2, β _ 2, β _ 2, β _ 2, β _ 2, β _ 2, β _ 2, β _ 2, β _ 2, β _ 2, β _ 2, β _ 2, β _ 2, β _ 2, β _ 2 and so on. Undifferentiated carcinomas are characterized by high levels of dysplasia and alpha cancers. The molecular cut-off method of undifferentiated cancer cells was used to study the clinical application of undifferentiated cancer. There are 7 cases in which the cancer is high, the cell gland is high, and the gland is unknown. At present, most of the typical organizations, such as RT-PCR and in situhybridization, are assigned to parse row data at the same time, and the full length of the data is not known.