超好熱菌の細胞分裂タンパク質に関する研究
超好熱菌の細胞分裂タンパク質に関する研究
批准号:
11750692
负责人:
藤原 伸介
金额:
$1.41万
依托单位:
依托单位国家:
日本
项目类别:
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份:
1999
资助国家:
日本
项目状态:
已结题
起止时间:
1999 至 2000
中文摘要
ゲノム解析に基づくと、超好熱菌の多くは真核生物のホモログを持っている。そのため、細胞分裂するときには、真核細胞が分裂するときと類似の周期調節があると考えられている。そこで、KOD1株のヌクレオイド構造と分裂について位相差と蛍光顕微鏡による観察を行った。KOD1のヌクレオイドは細胞の中心に位置し、対数増殖期と定常期の細胞は異なるヌクレオイド構造を示した。特に、定常期細胞のヌクレオイドは対数増殖期細胞のヌクレオイドに比べてサイズが大きく、細胞内部の大部分を占めていた。また、対数増殖期には様々な形態のヌクレオイドが観察され、細胞分裂は周期調節を受けていることが示された。KOD1の細胞周期の長さを測定するため、KOD1の対数増殖期の細胞の中から、形態的に区別される細胞の数を数え、その割合を調べた。その結果、KOD1の全細胞の中で40%は染色体が複製され細胞の狭窄が起こる前の状態にあることが認められ、KOD1の細胞は真核細胞と同様に長いG2期様の期間を有することが確認された。しかしKOD1細胞の狭窄が起こる期間は原核細胞と同様に短いことが示された。また、ヌクレオイドの形成にはヒストンによるDNAのコンパクト化が必要だが、KOD1株のヒストンが形成するヌクレオイドはポリアミンの添加により安定化されることも明らかになった。細胞分裂を行う上で、DNAポリメラーゼは遺伝子を複製する際に、中心的な役割を演じている。そこで、DNAポリメラーゼとそのインテインであるエンドヌクレアーゼについて結構構造解析を試みた。特にKOD1株のDNAポリメラーゼの構造が既知の酵素のものと異なる点がForked pointと名付けられた領域に認められた。この領域ではKOD1ポリメラーゼはDNAに対する親和力が高く、鋳型DNA・プライマーDNAを高度に安定化していることが予想された。
英文摘要
ゲノム解析に基づくと、超好熱菌の多くは真核生物のホモログを持っている。そのため、細胞分裂するときには、真核細胞が分裂するときと類似の周期調節があると考えられている。そこで、KOD1株のヌクレオイド構造と分裂について位相差と蛍光顕微鏡による観察を行った。KOD1のヌクレオイドは細胞の中心に位置し、対数増殖期と定常期の細胞は異なるヌクレオイド構造を示した。特に、定常期細胞のヌクレオイドは対数増殖期細胞のヌクレオイドに比べてサイズが大きく、細胞内部の大部分を占めていた。また、対数増殖期には様々な形態のヌクレオイドが観察され、細胞分裂は周期調節を受けていることが示された。KOD1の細胞周期の長さを測定するため、KOD1の対数増殖期の細胞の中から、形態的に区別される細胞の数を数え、その割合を調べた。その結果、KOD1の全細胞の中で40%は染色体が複製され細胞の狭窄が起こる前の状態にあることが認められ、KOD1の細胞は真核細胞と同様に長いG2期様の期間を有することが確認された。しかしKOD1細胞の狭窄が起こる期間は原核細胞と同様に短いことが示された。また、ヌクレオイドの形成にはヒストンによるDNAのコンパクト化が必要だが、KOD1株のヒストンが形成するヌクレオイドはポリアミンの添加により安定化されることも明らかになった。細胞分裂を行う上で、DNAポリメラーゼは遺伝子を複製する際に、中心的な役割を演じている。そこで、DNAポリメラーゼとそのインテインであるエンドヌクレアーゼについて結構構造解析を試みた。特にKOD1株のDNAポリメラーゼの構造が既知の酵素のものと異なる点がForked pointと名付けられた領域に認められた。この領域ではKOD1ポリメラーゼはDNAに対する親和力が高く、鋳型DNA・プライマーDNAを高度に安定化していることが予想された。
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Hashimoto H., et al: "Crystal structure of DNA polymerase from hyperthermophilic archalon Pyrococcus Kodakaraensis KOD1"J.Mol.Biol. (印刷中). (2001)
Hashimoto H. 等人:“来自超嗜热古球菌 Kodakaraensis KOD1 的 DNA 聚合酶的晶体结构”J.Mol.Biol.(出版中)。
DOI:
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发表时间:
期刊:
影响因子:
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作者:
[]
通讯作者:
Fujiwara S, et al.,: "Chaperonin from Thermococcus Kodakaraensis KOD1"Methods Enzynrol.. 293. 293-301 (2000)
Fujiwara S 等人:“来自 Thermococcus Kodakaraensis KOD1 的伴侣蛋白”Methods Enzynrol.. 293. 293-301 (2000)
DOI:
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发表时间:
期刊:
影响因子:
--
作者:
[]
通讯作者:
Hashimoto H.et al: "Crystallographic studies on a family B DNA polymevase from hyperthermophilic archaeon Pyrococcus kodakaraensis strain KOD1"J. Biochem.. 125・6. 983-986 (1999)
Hashimoto H.等人:“来自超嗜热古菌小田火球菌KOD1菌株的B族DNA聚合酶的晶体学研究”J. Biochem. 125・6(1999)。
DOI:
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发表时间:
期刊:
影响因子:
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作者:
[]
通讯作者:
Jeon,S-J., et al: "Unique nucleoid structure during cell division of Thermococcus Kodakaraensis KOD1"J.Biosci.Bioeng. (印刷中). (2001)
Jeon, S-J. 等人:“Thermococcus Kodakaraensis KOD1 细胞分裂过程中的独特核结构”J.Biosci.Bioeng(印刷中)。
DOI:
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发表时间:
期刊:
影响因子:
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作者:
[]
通讯作者:
Nagahisa K.et al: "Sequence and transcriptional studies of five clustered flagellin genes from hyperthermophilic archaeon Pyrococcus kodakaraensis KOD1"FEMS Microbiol : Lett.. 178・1. 183-190 (1999)
Nagahisa K.等人:“来自超嗜热古菌小田火球菌 KOD1 的五个簇状鞭毛蛋白基因的序列和转录研究”FEMS Microbiol : Lett.. 178・1 (1999)。
DOI:
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发表时间:
期刊:
影响因子:
--
作者:
[]
通讯作者:
共 12 条
Functional mechanisms of branched chain polyamines in thermophiles
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批准号:21H02112
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项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
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资助金额:$10.98万
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财政年份:2021
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负责人:藤原 伸介
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依托单位:
超好熱菌シャペロニンに関する基礎的研究及びそれを用いたタンパク質安定化システムの構築
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批准号:02F00204
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项目类别:Grant-in-Aid for JSPS Fellows
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资助金额:$1.09万
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财政年份:2002
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负责人:藤原 伸介
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依托单位:
超好熱菌におけるDNA再構成に関する研究
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批准号:08750928
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项目类别:Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
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资助金额:$0.64万
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财政年份:1996
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负责人:藤原 伸介
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依托单位:
海外基金