权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

ククモウイルス属ウイルスの複製酵素の種間相互作用機構の解明

阐明黄瓜病毒复制酶的种间相互作用机制

基本信息

批准号：
11760032
负责人：
鈴木匡
金额：
$ 1.34万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1999
资助国家：
日本
起止时间：
1999 至 2000
项目状态：
已结题

项目摘要

キュウリモザイクウイルス(CMV)とラッカセイわい化ウイルス(PSV)は、3分節グノムを持つククモウイルスに属する。ククモウイルスは複製酵素構成成分がRNA1、2それぞれにコードされ、複製には両成分(1aタンパク質、2aタンパク質)が必須である。両ウイルスの複製様式ならびに進化・適応を解明するため、RNA1、2を交換したシュードリコンビナントを人工的に作製し、タバコプロトプラストではPSV RNA1とCMV RNA2の組合せでは複製し、CMV RNA1とPSV RNA2の組合せでは複製しないことを示した。それら複製酵素成分のシュードリコンビナントの相互作用する部位を酵母Two hybrid法を用いて解析し、両ウイルスとも1aタンパク質のC末端領域と、2aタンパク質のN末端領域が相互作用することを証明した。特に、シュードリコンビナントではPSV1aタンパク質C末端領域と、CMV2aタンパク質N末端領域のみ相互作用し、逆の組み合わせでは相互作用しないことが示された。さらに、プロトプラストでのノーザン解析の結果、PSV RNA1とCMV RNA2の組み合わせではゲノム複製はするものの、コートタンパク質翻訳に必要なサブゲノムの転写がほとんどないことが明らかとなった。従って、感染細胞での複製は、複製酵素構成成分である1aタンパク質と2aタンパク質の相互作用が必須であるが、サブゲノムの転写には、さらに他の要因が必要であることが強く示唆され、それがシュードリコンビナントが自然界で発生しにくい原因と考えられる。相互作用した2aタンパク質のN末端領域は、単一ゲノムを持つタバコモザイクウイルスには存在しない領域であると推測されることから、この2aタンパク質のN末端領域はウイルス遺伝子の重複か、宿主遺伝子から獲得したもので、それがククモウイルスの進化と適応に重要な役割を果たしたと推測される。

The following is a list of the types of vehicles that are used to transport vehicles: The components of replication enzymes are RNA1 and RNA 2, and the components of replication enzymes (1a and 2a) are required. The combination of PSV RNA 1 and CMV RNA 2 is replicated by the combination of PSV RNA 1 and CMV RNA 2, and the combination of PSV RNA1 and CMV RNA2 is replicated by the combination of PSV RNA1 and CMV RNA2. The site of interaction between the replicative enzyme components was analyzed by yeast Two hybrid method, and the interaction between the C-terminal domain of the replicative enzyme components and the N-terminal domain of the replicative enzyme components was demonstrated. In particular, the interaction between PSV1a and CMV2a in the C-terminal domain and the interaction between PSV1a and CMV2a in the N-terminal domain is shown in the following table. The results of the analysis of PSV RNA1 and CMV RNA2 are as follows: The combination of PSV RNA1 and CMV RNA2 is necessary for replication, and the combination of PSV RNA1 and CMV RNA2 is necessary for quality conversion. The components of replicative enzymes in infected cells are essential for the interaction of replicative enzymes, and other essential factors are essential for their development in nature. The interaction between the 2a and the N-terminal domain of the substance is different from that between the 2a and the N-terminal domain of the substance. The interaction between the 2a and the N-terminal domain of the substance is different from that between the 2a and the N-terminal domain of the substance.