遺伝子ターゲッティングによるCBPの生理機能の研究

基因打靶研究CBP的生理功能

• 批准号: 11770069
• 负责人: 田中 康範
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: The Institute of Physical and Chemical Research
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 2000
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-11770069/
• 关键词: CBP; ノックアウトマウス; 遺伝病

CREBのコアクティベーターとして同定されたCBPがc-Mybをはじめとする様々な転写制御因子と結合しそのコアクティベーターとしても機能することが多数報告されている。さらにCBPが形態形成異常を伴う優勢遺伝病のRubinstein-Taybi Syndrome(RTS)の原因遺伝子であり2つの遺伝子のうち1つに変異を生じCBPの量が半分に減少することにより発症することが報告されている。そこで本研究ではCBPを介した遺伝子発現ネットワークの全体像及びCBPの量が半分になった時どのような転写制御因子の活性が優先的に阻害され形態形成異常を生じるのかを明らかにするためにCBP欠損マウスを作製し解析を行った。CBPホモ欠損マウスを作製し解析を行ったところCBPホモ欠損マウスは発育不全と頭部での神経管閉鎖異常を示した。さらに組織学的な解析を行ったところ頭部や体節の間質細胞数が野生型やヘテロ変異マウスと比較すると明らかに減少していた。またCBPホモ欠損マウスでは胎生12.5日までに特に頭部での出血が認められ致死となることが明らかになった。そのため頭部での血管形成を上皮細胞のマーカーであるCD31やCD34の抗体を用いて免疫組織学的に調べたところ頭部での血管形成が著しく阻害されていることを明らかにした。これらの異常の形成に関わる遺伝子もしくはCBPが発現に関与している遺伝子を突き止める目的でCBP欠損マウスから作製した細胞株やCBP欠損マウスを用いてDifferential Display法やSubtraction法を用いて解析を進めた。これらの方法ではCBPホモ欠損マウスもしくはCBP欠損細胞株において発現が減少しているいくつかの遺伝子を同定することができたがCBP欠損マウスにおける異常との関連は不明である。

After CREB の コ ア ク テ ィ ベ ー タ ー と し て with fixed さ れ た CBP が c - Myb を は じ め と す る others 々 な planning write suppression factor と combining し そ の コ ア ク テ ィ ベ ー タ ー と し て も function す る こ と が most reports さ れ て い る. さ ら に CBP が morphogenetic abnormal を with う advantages heritage 伝 disease の Rubinstein - Taybi Syndrome (RTS) cause of の survived 伝 で あ り 2 つ の posthumous son 伝 の う ち 1 つ に - born different を じ CBP の decrease が half points に す る こ と に よ り 発 disease す る こ と が report さ れ て い る. そ こ で this study で は CBP を interface し た posthumous son 伝 発 now ネ ッ ト ワ ー ク の entire like and び CBP の quantity が half に な っ た when ど の よ う な planning write suppression factor の activity が priority に resistance against さ れ morphogenetic abnormal を raw じ る の か を Ming ら か に す る た め に CBP owe loss マ ウ ス を cropping し parsing line を っ た. CBP ホ モ owe loss マ ウ ス を cropping し parsing line を っ た と こ ろ CBP ホ モ owe loss マ ウ ス は 発 education is not complete と head で の divinely 経 tube blocking abnormal を し た. Line analytical を さ ら に histological な っ た と こ ろ head や somite の mesenchymal cells number が wild-type や ヘ テ ロ - different マ ウ ス と compare す る と Ming ら か に reduce し て い た. ま た CBP ホ モ owe loss マ ウ ス で は viviparous 12.5 day ま で に te に head で の bleeding が recognize め ら れ death と な る こ と が Ming ら か に な っ た. そ の た め head で の を epithelial cells angiogenesis の マ ー カ ー で あ る CD31 や CD34 antibody を の with い て immune histological に adjustable べ た と こ ろ head で の vascular formation が し く resistance against さ れ て い る こ と を Ming ら か に し た. こ れ ら の anomalies result の に masato わ る posthumous son 伝 も し く は CBP が 発 now に masato and し て い る posthumous son 伝 を tu き check め る purpose で CBP owe loss マ ウ ス か ら cropping し た cell lines や CBP owe loss マ ウ ス を with い て Differential Display method や を Subtraction method with い て parsing を into め た. こ れ ら の way で は CBP ホ モ owe loss マ ウ ス も し く は CBP owe damaged cell lines に お い て 発 が now reduce し て い る い く つ か の posthumous son 伝 を with fixed す る こ と が で き た が CBP owe loss マ ウ ス に お け る abnormal と の masato even unknown は で あ る.

项目成果

Tanaka Y. et el.: "Extensive brain hemorrhage and embryonic lethality in a mouse null mutant of CREB-binding protein""Mechanisms of Development. 95. 133-145 (2000)

Tanaka Y.等：“CREB结合蛋白的小鼠无效突变体中的广泛脑出血和胚胎致死”“发育机制。95. 133-145 (2000)

Yasunori Tanaka et al.: "B-myb Is Required for Inner Cell Mass Formation at an Early Stage of Development"THE JOURNAL OF BIOLOGICAL CHEMISTRY. 244・40. 28067-28070 (1999)

Yasunori Tanaka 等：“B-myb 是发育早期内细胞团形成所必需的”生物化学杂志 244・40（1999）。