メラノーマ細胞由来の細胞運動阻害因子の精製とその癌転移に及ぼす影響

黑色素瘤细胞源性细胞运动抑制因子的纯化及其对癌症转移的影响

• 批准号: 11770113
• 负责人: 村田 純
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: Toyama Medical and Pharmaceutical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 2000
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-11770113/
• 关键词: α-MSH; メラノーマ; 細胞運動; 運動阻害因子; 癌転移

研究代表者らは既に、神経ペプチド:α-melanocyte stimulating hormone(α-MSH)が、a)マウスの自然肺転移実験においてマウスメラノーマB16-BL6細胞の組織浸潤及びその肺転移を著明に抑制すること、b)in vitroにおいて上記癌細胞による基底膜浸潤を有意に阻害すること、c)その作用機序として主に癌細胞の運動性を抑制すること、さらにd)その運動性阻害には、a-MSH刺激で誘導される自己分泌型運動阻害因子の産生促進が強く関与していることなどを明らかとしてきた。本研究は、a-MSHによるB16-BL6メラノーマ細胞の運動、浸潤及び転移抑制機序の中核をなすと考えられる自己分泌型運動阻害因子の分離、精製及びその分子構造を明らかにするとともに、他のメラノーマ細胞の運動性に及ぼすこの分子の効果を検定することを目的とした。1)高速液体クロマトグラフィーにより、マウスB16-BL6メラノーマ細胞より分泌されるα-MSH誘導性の自己分泌型運動阻害因子の分離を試みた結果、逆相(C18)カラムを用いたグラジエント溶出でアセトニトリル濃度:10%付近に強い細胞運動阻害活性を有するシングルピークが得られた(分子量3kDa以下)。現在、この活性画分の構造を解析中である。2)上記自己分泌型運動阻害因子の精製画分を用いて、B16-BL6細胞以外のメラノーマの運動性に及ぼす影響を検討した結果、ヒトA2058メラノーマ及びマウスK1735M2メラノーマ細胞の運動性は有意に抑制された。同様の運動阻害効果は、α-MSHを用いた場合にも認められた。3)他の癌種の運動性に及ぼす自己分泌型運動阻害因子の影響を検討した結果、マウス肺癌3LL、マウス腎癌Renca、マウス肝細胞癌Hepa1-6、マウス結腸癌Colon26-L5、ヒト線維芽細胞HT-1080には影響を与えなかったが、メラノサイトと発生学的に起源を同じくする神経芽細胞由来のマウス神経芽細胞腫N18TG-2細胞に対し、その運動性を有意に抑制した。

研究人员已经表明，神经肽：α-甲状腺细胞刺激激素（α-MSH）显着抑制了小鼠黑色素瘤B16-BL6细胞的组织侵袭及其在婴儿肺部转移实验中的肺部内发生的肺部的肺部转移，b）在肿瘤的癌症中，伴有膜的癌症，c弥期性癌症，b）的动机，c弥期性癌症，c癌的癌症，c癌的癌症，c癌的癌症，c癌的癌症，c癌的癌症，c癌的癌症，c癌，c癌的癌症。作用和d）其运动抑制与A-MSH刺激对运动的抑制很大。这项研究旨在阐明自分泌运动抑制剂的分离，纯化和分子结构，这些抑制剂被认为是通过A-MSH抑制B16-BL6黑色素瘤细胞的运动，侵袭和转移机制的核心，并测试该分子对其他黑色素瘤细胞运动的作用。 1）试图通过高性能液相色谱法分离从小鼠B16-BL6黑色素瘤细胞中分泌的α-MSH诱导的自分泌抑制剂，并在使用反向相位相（C18）柱（C18）（C18）（Molecular Tomge：3 KDA或更少）的梯度洗脱时获得具有强细胞运动抑制活性的单个峰。目前正在分析此主动分数的结构。 2）使用上述自分泌运动抑制剂的纯化部分，我们研究了B16-BL6细胞以外的黑色素瘤对运动性的影响，结果，人A2058黑色素瘤和小鼠K1735M2黑色素瘤细胞的运动性得到了显着抑制。当使用α-MSH时，还观察到抑制运动运动的类似作用。 3）由于自分泌运动抑制剂对其他癌症类型的运动的影响，它对小鼠肺癌没有影响3LL，小鼠肾癌Renca，小鼠HEPA1-6，小鼠结肠癌结肠癌结肠26-L5，人类成纤维细胞HT-1080，但它显着抑制了其在小鼠Neuroloblasto neur neur neur neur neur neur nithablasts n Ne18 TG-2中的动力黑素细胞。