ヒト由来毒素原性大腸菌が産生する線毛性定着因子の解析とワクチン開発

人源性产毒大肠杆菌产生的菌毛定植因子分析及疫苗开发

• 批准号: 11770144
• 负责人: 谷口 暢
• 金额: $ 1.09万
• 依托单位: Nagoya City University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 2000
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-11770144/
• 关键词: 毒素原性大腸菌; 定着因子; ワクチン

1.CFA/III遺伝子産物の生物学的機能解析ヒト由来毒素原性大腸菌(以下ETECと省略する)が産生する線毛性定着因子CFA/IIIの構築に関与する遺伝子群(cofオペロン)は、major pilin遺伝子(cofA)とprepilin peptidase遺伝子(cofP)を含め合計14個の遺伝子で構成している。そこで、各遺伝子内にトランスポゾン挿入後、各遺伝子産物の機能を解析したところ、cofAの上流に位置するcofRおよびcofSは、CofAの産生にかかわっていることが考えられた。また、cofAの下流に位置する各遺伝子(cofBからcofJ)は、線毛の形成ならびにCaco-2細胞への付着に不可欠であった。特に、cofJは分子量約39kDaのタンパク質をコードしており、この遺伝子産物はCFA/III産生性ETECのCaco-2細胞への付着を競合阻害(ブロック)することから、cofJがCFA/IIIのadhesin遺伝子であることが考えられた。2.精製CFA/III抗原の免疫応答BALB/cマウスに精製CFA/III(5μg)を4回経鼻投与したところ、全身免疫応答(血清IgGとIgA)が誘導された。さらに、粘膜免疫応答(粘膜IgA)も小腸ならびに糞便中に認められたことからETEC感染症の予防に定着因子が経鼻ワクチンとして利用できることが考えられた。

1. Biological functional analysis of the CFA/III genetic product: Toxin-producing coliform (hereinafter ETEC is omitted) and production of CFA/III genetic factors. pilin 伝子 (cofA) and prepilin peptidase 伝子 (cofP) are composed of 14 pieces in total.そこで、After inserting the にトランスポゾン inside each 伝子, the function of each 伝子product is analyzedしたところ、cofAのThe location of the upper stream is the cofR, and the CofA is the production.また, cofA's downstream position するeach left 伝子 (cofB からcofJ) は, line hair の formation ならびにCaco-2 cells へのpay に不不owed であった. Special に, cofJ は molecular weight is about 39kDa のタンパクquality をコードしており, この缝子product はCFA/III-producing ETEC のCaco- 2 Cells are equipped with することから, cofJがCFA/IIIのadhesin legacy 伝子であることが考えられた. 2. Purified CFA/III antigen immune response BALB/cマウスに Purified CFA/III (5μg) was administered intranasally 4 times to induce systemic immune response (serum IgG and IgA).さらに、mucosal immune response (mucosal IgA) もsmall intestine ならびに in feces にidentification められたことからE The prevention and control factors of TEC infection are determined by the use of TEC infection prevention factors.

项目成果

Isaka,M.,Y.Yasuda,M.Mizukami,S.Kozuka,T.Taniguchi,K.Matano et.al.: "Mucosal immunization against hepatitis B virus by intranasal co-administration of recombinant hepatitis B surface antigen and recombinant cholera toxin B subunit as an adjuvant"Vaccine. 1

Isaka,M.,Y.Yasuda,M.Mizukami,S.Kozuka,T.Taniguchi,K.Matano 等人：“通过鼻内共同施用重组乙型肝炎表面抗原和重组霍乱来对抗乙型肝炎病毒的粘膜免疫

Isaka,Masanori: "Induction of systemic and mucosal antibody responses in mice immunized intranasally with aluminium-non-adsorbed diphtheria toxoid together with recombinant cholera toxin B subunit as an adjuvant"Vaccine. 18・7/8. 743-751 (2000)

Isaka，Masanori：“用非吸附性白喉类毒素与重组霍乱毒素 B 亚基作为佐剂鼻内免疫的小鼠中诱导全身和粘膜抗体反应”18·7/8 疫苗。

Taniguchi,Tooru: "The gene cluster for assembly of pilus colonization factor antigen III of human enterotoxigenic Escherichia coli"The 35th.Joint Conference U.S.-Japan Cooperative Medical Science Program,Cholera and Other Bacterial Enteric Infections. 248

Taniguchi，Tooru：“人产肠毒素大肠杆菌菌毛定植因子抗原 III 组装的基因簇”第 35 届美日合作医学科学计划联合会议，霍乱和其他细菌性肠道感染。

Kozuka,S.,Y.Yasuda,M.Isaka,N.Masaki,T.Taniguchi,K.Matano et.al.: "Efficient extracellular production of recombinant Escherichia coli heat-labile enterotoxin B subunit by using the expression/secretion system of Bacillus brevis and its mucosal immunoadjuva

Kozuka,S.,Y.Yasuda,M.Isaka,N.Masaki,T.Taniguchi,K.Matano 等人：“利用表达/分泌系统高效胞外生产重组大肠杆菌不耐热肠毒素 B 亚基

Taniguchi,T.,Y.Akeda,A.Haba,Y.Yasuda,K.Yamamoto,T.Honda et.al.: "The gene cluster for assembly of pilus colonization factor antigen III (CFA/III) of human enterotoxigenic Escherichia coli"Infection and Immunity. (in press).

Taniguchi,T.,Y.Akeda,A.Haba,Y.Yasuda,K.Yamamoto,T.Honda 等人：“人产肠毒素埃希氏菌菌毛定植因子抗原 III (CFA/III) 组装的基因簇