ヒト由来毒素原性大腸菌が産生する線毛性定着因子の構築に関与する遺伝子群の解析

人源性产毒大肠杆菌产生菌毛定植因子构建相关基因的分析

• 批准号: 09770190
• 负责人: 谷口 暢
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: Nagoya City University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 1998
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09770190/
• 关键词: 毒素原性大腸菌; 定着因子; ワクチン

1. CFA/III遺伝子産物の生物学的機能解析ヒト由来毒素原性大腸菌(enterotoxigenic Escherichia coli:以下ETECと省略する)が産生する線毛性定着因子CFA/IIIの構築に関与する遺伝子群(以下cofオペロンと省略する)は、既知のmajor pilin遺伝子(cofA)とprepilin peptidase遺伝子(cofP)を含め合計14個の遺伝子(オープンリーディングフレーム:以下orfと省略する)から構成していた。そこで、制限酵素を利用して種々の欠失変異体(遺伝子のノックアウト)を作製後、各遺伝子産物の役割を解析したところ、cofAの上流に位置する。orf1とorf2(AraC familyに属する)はCofAの発現を正調節し、orf3は線毛の長さに関与していることが考えられた。一方、cofAより下流に位置するorf4(minor pilin)とorf6(外膜リポタンパク)は線毛構築に不可欠であることがわかった。現在、他のorfについて解析している。2. 生菌ワクチン候補株の作製cofオペロンを非病原性大腸菌(大腸菌HB101)へクローン化を行ったところ、菌体表面上にCFA/III線毛の産生が認められ、且つ、CFA/III産生性ETECと同様に培養細胞Caco-2(大腸癌由来細胞)への付着能があった。現在、このクローン株を使って定着因子をターゲットとしたETEC生菌ワクチン開発および他の抗原遺伝子(ETEC易熱性エンテロトキシンBサブユニットやコレラ毒素Bサブユニットなど)を導入したワクチンデリバリーとしての可能性を検討している。

1. Biological functional analysis of CFA/III gene product The gene group responsible for the construction of linear determinant CFA/III gene product is composed of 14 known major pilin gene (cofA) and prepilin peptidase gene (cofP). After the production of these enzymes, the analysis of their products and the upstream position of cofA. Orf1 and orf2 (AraC family members) are positively regulated by the occurrence of CofA, and orf3 is related to the length of CofA. A side, cofA Now, he's orf 2. The production of CFA/III line hairs on the surface of bacteria is recognized, and CFA/III production ETEC and the same culture cell Caco-2(colon cancer origin cell) are also recognized. Now, we discuss the possibility of introducing ETEC strains into ETEC strains, which are stable factors, and other antigenic proteins (ETEC heat susceptibility, ETEC toxin B, ETEC toxin B, etc.).

项目成果

杤久保邦夫: "Recombinant cholera toxin B subunit acts as an adjuvant for the mucosal and systemic responses of mice to mucosally co-administered bovine serum albumin" Vaccine. 16・2/3. 150-155 (1998)

Kunio Kokubo：“重组霍乱毒素 B 亚基作为小鼠对粘膜共同施用的牛血清白蛋白的粘膜和全身反应的佐剂”16・2/3 疫苗。

谷口 暢: "ヒト由来毒素原性大腸菌の定着因子CFA/IIIの構築に関与する遺伝子群の解析" 日本細菌学雑誌. 53・1. 281 (1998)

Noburu Taniguchi：“人源性产毒大肠杆菌的定植因子 CFA/III 构建相关基因的分析”，日本细菌学杂志 53・1（1998 年）。

谷口 暢: "線毛性定着因子CFA/IIIオペロンの解析" 日本細菌学雑誌. 54・1. 292 (1999)

Noburu Taniguchi：“菌毛定植因子CFA/III操纵子的分析”日本细菌学杂志54・1（1999）。

井坂雅徳: "組換えコレラ毒素Bサブユニットをアジュバンドとした破傷風トキソイドの経鼻投与による破傷風発症予防効果" 日本細菌学雑誌. 53・1. 233 (1998)

Masanori Isaka：“鼻内施用重组霍乱毒素 B 亚基佐剂的破伤风类毒素对破伤风发病的预防作用”，日本细菌学杂志 53, 1. 233 (1998)。

Isaka,Masanori: "Intranasal or subcutaneous co-administration of recombinant cholera toxin B subunit stimulates only a slight or no level of the specific IgE response in mice to tetanus toxoid" Vaccine. 17・7/8. 944-948 (1999)

Isaka，Masanori：“重组霍乱毒素 B 亚基的鼻内或皮下联合给药仅刺激小鼠对破伤风类毒素的特异性 IgE 反应水平轻微或无”疫苗 944-948。