サルモネラcpxR-A遺伝子の宿主細胞侵入能及び病原性への関与の検討

沙门氏菌cpxR-A基因与宿主细胞侵袭能力和致病性的关系研究

• 批准号: 11770150
• 负责人: 中山 周一
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: National Institute of Infectious Diseases
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 2000
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-11770150/
• 关键词: サルモネラ; 細胞侵入; 発現制御; cpxR; cpxA

ShigellaのipaBCD遺伝子産物は菌の上皮細胞への侵入能を直接担う。また、このipaBCD遺伝子はvirF、invEという2つの制御遺伝子によって正に調節され、さらに、virFの発現は染色体上にコードされる2成分制御系遺伝子cpxR-cpxAによってpH依存的に制御される。Salmonellaにおいて侵入能を担うsipBCDはShigella ipaBCDに相同性を示し、それに対する2つの正の発現制御遺伝子hilA、invFが存在するという制御様式も共通点がある。このような背景から、Shigella virFとSalmonella hilAの発現を制御する因子も共通している可能性がある。これを基に、本研究ではSalmonellaにおけるcpxR-cpxA相同遺伝子のhilA、invFやsipBCD遺伝子発現、ひいては総体的な病原性への関与を検討、解明することを目的とした。SalmonellaのcpxR-cpxA相同遺伝子の存在確認後、それらをクローニングし、そのクローンを用いてSalmonellaのcpxR,cpxAそれぞれの遺伝子破壊株を作製した。これら野生株、及び各破壊株で、1)hilA発現レベル、2)SipC産物(タンパク)量、3)哺乳類培養細胞への侵入能、を培養pHを変化させて測定、比較した。結果、cpxA変異株においてpH6.0培養後にいずれも大きな低下が見られた。pH8.0培養後はhilA発現レベルで若干の低下が見られた以外、野生株との差は検出できなかった。cpxR変異株では野生株との差異は検出できなかった。野生株、cpxR変異株ではいずれの項目もpHによる変化がなかった。以上より、cpxA遺伝子は、pH6.0での培養条件でのhilA発現、従ってその制御下にあるsipBCD発現、最終的には細胞侵入能の活性化に強く関与することが分かった。cpxR-cpxAはペアーを成す2成分制御系遺伝子であるが、この制御系でセンサーであるCpxAと連絡し、ターゲット遺伝子の転写を行なうレギュレーターとしてCpxR以外のものが機能すると考えられ、それを同定することが次なる課題となった。

Shigella's ipaBCD gene product directly contributes to the invasion of epithelial cells by bacteria. The virF, invE, and virF genes are expressed in two components: virF, invE, and pH-dependent control genes. Salmonella intrusion can be carried out by sipBCD, Shigella ipaBCD identity can be displayed, and there are two positive control elements hilA, invF, and there are two common control elements. The possibility of common factors controlling the occurrence of Shigella virF and Salmonella hilA is discussed. This study aims to investigate and clarify the pathogenicity of Salmonella spp., such as hilA, invF, sipBCD, and so on. After confirming the existence of Salmonella cpxR-cpxA identical gene, we will prepare a new strain of Salmonella cpxR,cpxA. Wild plants, wild plants, 1)hilA production, 2)SipC production, 3) invasion ability of mammalian cultured cells, and pH change measurement and comparison. The results showed that cpxA mutant plants were cultured at pH6.0, and the results showed that cpxA mutant plants were cultured at pH6.0, and the results showed that cpxA mutant plants were cultured at pH6.0. After pH8.0 culture, hilA appeared in some plants except wild plants. cpxR mutant plants are wild plants, and the differences between them are not obvious. Wild plants, cpxR plants, etc. Under the culture conditions of pH6.0, hilA production, sipBCD production, and finally activation of cell invasion ability were strongly related. cpxR-cpxA is composed of two components: control system, transmission system, communication system, transmission system,