動脈硬化成立過程における新規エンドセリン、ET-1(1-31)の生理機能の解析

新型内皮素ET-1(1-31)在动脉硬化形成过程中的生理功能分析

基本信息

批准号：
11770354
负责人：
丹羽保晴
金额：
$ 1.22万
依托单位：
The University of Tokushima
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1999
资助国家：
日本
起止时间：
1999 至 2000
项目状态：
已结题

项目摘要

我々はヒトキマーゼがbig ET-1から31個のアミノ酸からなる新規血管作動性ペプチド、ET-1(1-31)に変換することを見出している。このET-1(1-31)はETA受容体を介して血管収縮反応、細胞内カルシウムの上昇、サイクリンD1を介した細胞増殖能を誘導し、また内皮細胞ではETB受容体を介して一酸化窒素(NO)の産生を促進するなど多彩な生理機能を明らかにした。しかし、in vivoでの基礎データと心疾患でのデータが少ない。本研究はハムスターを用いて、動脈硬化の進展とET-1(1-31)の生理機能の関連性を検討した。普通食、高脂肪食、高脂肪食+L-NAME群の3群を作成し、10週間と40週間処置後の血圧、組織染色、血管張力反応、酵素活性を測定し、解析した。組織の病態変化は、40週間の処置で、高脂肪食群+L-NAME>高脂肪食群の順で大動脈弓、心血管の肥厚が顕著に確認できた。また、胸部大動脈のキマーゼとアンギオテンシン変換酵素、ACEの酵素活性をANGIからANGIIへの変換率、big ET-1からET-1(1-31)への変換率としてHPLCにより解析した。その結果、3群とも処置期間が長いほど両酵素の酵素活性が上昇し、特に高脂肪食+L-NAME>高脂肪食>普通食群の順に酵素活性の上昇が認められた。エンドセリン変換酵素の活性も測定したが、キマーゼやACEほど処置期間と処置法による酵素活性の上昇はなかった。この結果より、動脈硬化の進行にキマーゼとACEが関与し、ET-1(1-31)の生成はキマーゼによることが判明した。更に血管張力反応を解析した結果、ET-1は血管病態の進行と共に内皮依存的にETA受容体を介して血管収縮反応を起こすことが判明した。ET-1(1-31)は10週間の処置ではETA受容体特異的な血管収縮反応を示したが、40週間の処置では高脂肪食+L-NAME、高脂肪食群の順にETB受容体への親和力が上昇することが判明した。以上の結果から動脈硬化の進展にET-1(1-31)が関与するデータが得られ、その作動伝達経路がET-1と異なる可能性が示唆された。

我们发现人类卫生酶将大ET-1转换为ET-1（1-31），这是一种由31个氨基酸组成的新型血管活性肽。该ET-1（1-31）揭示了多种生理功能，例如通过ETA受体诱导的血管收缩反应，细胞内钙的升高以及细胞周期蛋白D1介导的细胞增殖能力，而在内皮细胞中，促进了ETB受体的硝酸氧化物（NO）产生。但是，体内几乎没有基本数据和心脏病的数据。这项研究使用仓鼠研究了动脉硬化的进展与ET-1的生理功能之间的关系（1-31）。准备了三组：定期饮食，高脂饮食和高脂饮食 + L名称组，以及血压，组织染色，血管张力反应以及治疗10和40周后的酶活性。在治疗40周后，高脂饮食组 +高脂饮食组明显证实了组织病理变化的变化，并在高脂饮食组的秩序中对主动脉弓和心血管疾病的增厚。此外，通过HPLC分析了Chymase，血管紧张素转换酶和ACE的酶活性，作为从ANGI到AngII的转化率，以及从BIG ET-1到ET-1的转化率（1-31）。结果，随着三组治疗期的更长，两种酶的酶活性都增加，并且酶活性尤其在高脂饮食 + L-name> l-name>高脂饮食>正常饮食的顺序上增加。还测量了内皮素转化酶的活性，但是由于治疗期和治疗方法而导致的酶活性没有增加，与Chymase或Ace一样高。这些结果表明，芝麻酶和ACE参与了动脉硬化的进展，并且ET-1（1-31）的产生是由Chymase引起的。此外，血管张力反应分析表明，随着血管病理的发展，ET-1通过内皮依赖性方式通过ETA受体引起血管收缩反应。 ET-1（1-31）在10周的治疗过程中显示出ETA受体特异性的血管收缩反应，但发现在40周治疗后，对ETB受体的亲和力在高脂饮食 + L-NAME和高脂饮食组中增加。上述结果提供了涉及动脉硬化进展中ET-1（1-31）的数据，这表明其致动路径可能与ET-1不同。