肺高血圧症における新たな機序の解明：エンドセリン受容体におけるβアレスチンの役割

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in vitroの系においては、ヒト肺動脈平滑筋細胞を購入、培養し、研究を行った。まずはsiRNAを用いてβアレスチン1またはβアレスチン2をノックダウンした。ウエスタンブロットおよび定量的PCRにて良好なβアレスチン1、またはβアレスチン2ノックダウンを確認した。次に、エンドセリンを用いてヒト肺動脈平滑筋細胞を刺激し、extracellular-related kinase(ERK)およびAktのリン酸化を測定し、βアレスチン1またはβアレスチン2のノックダウンの効果を検討した。エンドセリン刺激によるERKのリン酸化はβアレスチン1またはβアレスチン2のノックダウンにより亢進していた一方で、Aktのリン酸化はβアレスチン2のノックダウンでのみ亢進していた。炎症性サイトカインであるTumor necrosis factor-α、Transforming Growth Factor-βの発現およびコラーゲン3a1の発現はβアレスチン2のノックダウンで亢進していたのに対し、βアレスチン1のノックダウンでは差を認めなかった。in vivoの系においては、野生型マウスに対してモノクロタリンを8週間投与することによって、肺高血圧症を誘導した。モノクロタリンの投与によって、右室肥大、およりMillarカテーテルで測定した右室圧の上昇を認めた。また組織学的には、肺小細動脈の肥厚、および動脈壁への炎症細胞の浸潤を認めた。