リゾホスファチジン酸による好中球活性酸素生成の調節およびその異常の意義

溶血磷脂酸对中性粒细胞活性氧产生的调节及其异常的意义

• 批准号: 11770585
• 负责人: 伊藤 良和
• 金额: $ 0.9万
• 依托单位: Tokyo Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 2000
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-11770585/
• 关键词: 好中球; リゾリン脂質; スーパーオキシド; 一酸化窒素

活性酸素生成及び分解調節が広い意味での生体防御と考えられる。好中球活性化過程でのホスホリパーゼA_2によるリン脂質分解産物であるリゾリン脂質のうち、リゾホスファチジルコリンは活性酸素生成能を増強するが、リゾホスファチジン酸(LPA)は抑制する。われわれは加齢に伴うLPAの過剰生成がスーパーオキシド(SO)生成能低下に関与していることを報告し(FEBS Lett 394:149,1996)、抑制因子による好中球活性化調節メカニズムの存在を示唆した。LPAは他の細胞系においては受容体を介し低分子量G蛋白の活性化やアクチン重合を起こすが、好中球ではこの受容体の存在は確認されていない。そこでLPA処理好中球において好中球SO生成におよぼす効果を検討した。ヒト末梢好中球を分離し、シトクロムc還元法にて測定したphorbol myristate acetate(PMA)刺激SO生成能はLPA処理にて低下した。しかし、LPA処理好中球でアクチン重合を蛍光色素Oregon Green 488 Phalloidin(Molecular Probes)を用いてflow cytometryにて測定したところ、アクチン重合は見られなかった。よって、受容体を介した通常の経路でのLPAの効果では好中球活性酸素生成能に対する効果は説明ができないと考え、nitric oxide(NO)synthase inhibitorのN^G-nitro-L-arginine methyl eater(L-NAME)存在下でSO生成能を測定したところ、LPAによる抑制効果は回復した。そこで、diaminofluorescein-2 diacetate(DAF-2 DA)を用いflow cytometryにて測定した結果、NO生成能はLPA非存在下に対しLPA存在下では増加し、LPAのNO産生への関与が示唆された。NOとSOが反応しperoxynitriteが生成されている可能性を考え、SO由来活性酸素とperoxynitriteを両方とも検知するdihydrorhodamine 123(DHR123)の蛍光強度をPMA刺激下でflow cytometryにて測定したところ、上記のLPAによる抑制効果はほとんど認めなかった。以上よりNO産生が関与しSOと反応することによりこの抑制効果が生じる可能性が示唆された。

The regulation of active acid generation and び decomposition が broad び means で and the defense of the body と examines えられる. Good ball in the activation process で の ホ ス ホ リ パ ー ゼ A_2 に よ る リ ン lipid breakdown products で あ る リ ゾ リ ン lipid の う ち, リ ゾ ホ ス フ ァ チ ジ ル コ リ ン は acid active element can generate strong を raised す る が, リ ゾ ホ ス フ ァ チ ジ ン acid (LPA) は inhibit す る. わ れ わ れ は plus 齢 に う LPA の have turning generated が ス ー パ ー オ キ シ ド (SO) can generate low に masato and し て い る こ と し を report (FEBS Lett, 394, 149199, 6), inhibiting factor に よ る good ball activeness in regulating メ カ ニ ズ ム の is を in stopping し た. LPA は he の cell line に お い て は を interface by let body し low molecular weight protein G の activeness や ア ク チ ン overlap を up こ す が, good in ball で は こ の by let body の exist は confirm さ れ て い な い. Youdaoplaceholder0 を検 でLPA processes the center ball にお て て the center ball SO generates におよぼす effect を検 to claim た. Youdaoplaceholder0 peripheral mesophore を separation of <s:1>, シト <s:1> ロムc ロム reduction method にて determination of たphorbol myristate acetate(PMA) stimulation of SO production capacity ヒト LPA treatment of にて low た. Good し か し, LPA 処 in で ア ク チ ン overlap を 蛍 photopigment Oregon Green 488 Phalloidin (Molecular) the Probes を with い て flow cytometry に て determination し た と こ ろ, ア ク チ ン overlap は see ら れ な か っ た. よ っ て, let body を interface し た usually の 経 road で の LPA の unseen fruit で は good acid production activity of ball can に す seaborne る unseen fruit は illustrate が で き な い と え test, nitric oxide (NO) synthase inhibitor の N ^ G - nitro - L - arginine methyl The でSO generation energy を in the presence of eater(L-NAME) determined the <s:1> たと ろ ろ ろ and the inhibitory effect of LPAによる を responded to た た. そ こ で, diaminofluorescein - 2 diacetate (daf-2 DA) を い flow cytometry に て determination し た results, NO can generate は LPA the presence of に し LPA presence of seaborne で は raised し, LPA の NO produce へ の masato and が in stopping さ れ た. NO と SO が anti 応 し peroxynitrite が generated さ れ て い る possibility を え test, SO its active acid element と peroxynitrite を struck party と も 検 know す る dihydrorhodamine 123 (DHR123) の 蛍 light intensity を PMA stimulation で under flow cytometryにて was used to determine the inhibitory effect of <s:1> たと ろ ろ ろ, and the inhibitory effect of <s:1> LPAによる was recorded. The inhibitory effect was confirmed by めな ほとん <e:1>. Above よ り NO produce が masato and し SO と anti 応 す る こ と に よ り こ の inhibition of unseen born fruit が じ が る possibility in stopping さ れ た.