肺癌に対する光感受性物質(フェオフォバイドa)を用いた光線力学的治療

使用光敏剂（脱镁叶酸 a）治疗肺癌的光动力疗法

• 批准号: 11770737
• 负责人: 高橋 渉
• 金额: $ 1.6万
• 依托单位: 山梨医科大学
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 2000
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-11770737/
• 关键词: フェオフォーバイドa; 光線力学療法; 肺癌細胞株; 細胞内濃度; Na-フェオフォーバイドa; 光線力学的治療; フェオフォバイトa; ND:YAGレーザー; DNA障害; 細胞内至適濃度; 殺腫瘍効果

(目的)低エネルギーレーザー照射と腫瘍親和性光感受性物質を組み合わせた癌のphotodynamic therapy(PDT)は、1996年4月よりPhotofrinとエキシマダイレーザーの組み合わせが保険適応となったが、全身投与による副作用の日光過敏症のため長期の暗室内生活が余儀なくされ臨床応用例は増えていない。クロロフィル(葉緑素)の代謝により生じる光感受性物質Pheophorbide a(Phde a)は、静注および局注においても光照射で高い殺腫瘍効果が得られることが報告されているが、水に難溶性のため有機溶媒等にて溶解してから作用させる必要があり一般的でなかった。今回我々は、水溶性のPhde aのNa塩(Na-Phde a)を調整し、腫瘍内へ局注することを前提とした基礎的実験を施行した。(対象・方法)ヒト肺扁平上皮癌の細胞株(RERF-LC-AI)を使用してNa-Phde aを0.01、0.02、0.04、0.06、0.08、0.1mg/mlの濃度に調整し、5分、30分、1時間、2時間、4時間、6時間作用させた。作用時間終了後は直ちに細胞を洗浄し、細胞に取り込ませたPhde aをメタノールにて抽出後、分光学的に色素量を測定した。培養癌細胞内へのPhde取り込み濃度は色素量よりLambert-Beerの法則を用いて算出し細胞内濃度を求めた。さらに培養癌細胞に対しその結果を考慮した濃度および時間変数でNa-Phde aを作用させ、300Wハロゲン光を15分間照射によるPDTを施行し、殺細胞効果をMTT試験法にて3日後判定した。(結果)細胞内に取り込ませたPhde aの濃度は、その細胞内濃度曲線よりおよそ4時間で飽和状態に達し、Na-Phde aの濃度が0.04mg/ml以上ならば細胞内の飽和濃度が約1.4pg/cellと最高濃度に達した。次にNa-Phde aの濃度を0.04mg/mlとし、培養癌細胞に5分、15分、30分、1時間、4時間作用させPDTを施行したが、1時間以上作用させることでコントロールとの相対生存率は3%以下となり有意に培養癌細胞は死滅した(p<0.01)。(結語)1.Na-Phde aは0.04mg/mlという低濃度でも4時間作用させれば細胞内最高濃度に達した。2.濃度0.04mg/mlのNa-Phde aを1時間作用させる程度で十分な殺腫瘍効果が得られた。

(Purpose) Photodynamic therapy(PDT) for cancer that combines low ERIEL radiation and tumor-affinity photoreceptor substances has been developed in April 1996. The combination of Photofrin and EkisimamadaiEL has been used to ensure effective treatment, and the side effects of whole-body administration such as sunlight allergy and long-term dark room life have been eliminated. Clinical use cases have increased. Photosensitive substance Pheophorbide a(Phde a), intravenous injection, light irradiation, high killing effect, report of dissolution, water insoluble organic solvent, etc. Now we have to adjust the water solubility of Phde a (Na-Phde a), and we have to adjust the water solubility of Phde a (Na-Phde a). (Object·Method) The RERF-LC-AI cell line was treated with Na-Phde a at concentrations of 0.01, 0.02, 0.04, 0.06, 0.08, 0.1 mg/ml for 5 min, 30 min, 1 min, 2 min, 4 min, and 6 min. At the end of the action time, the amount of pigment in the cells was measured. In cultured cancer cells, Phde concentration is calculated using Lambert-Beer method. The results of culture of cancer cells were determined by MTT assay after 3 days of treatment with Na-Phde a, 300W, 15 minutes of light and PDT. (Results) The concentration of Phde a in the cells was about 1.4 pg/cell, and the concentration curve of Phde a in the cells reached saturation state at about 4 hours. The concentration of Na-Phde a was more than 0.04 mg/ml, and the maximum concentration of Phde a in the cells reached saturation state. When the concentration of Na-Phde a was 0.04 mg/ml, the survival rate of cultured cancer cells was less than 3%(p<0.01). (Conclusion)1.Na-Phde a is 0.04mg/ml and the highest concentration in cells is reached after 4 hours of action. 2. Na-Phde at a concentration of 0.04 mg/ml was found to be very effective in killing tumors.