中枢神経系幹細胞と中胚葉組織の同時移植による脳梗塞ラットの機能回復に関する研究

中枢神经系统干细胞与中胚层组织同时移植对脑梗死大鼠功能恢复的研究

• 批准号: 11770774
• 负责人: 福永 篤志
• 金额: $ 0.51万
• 依托单位: Keio University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 2000
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-11770774/
• 关键词: 神経幹細胞; 中胚葉組織; 同時移植; 脳梗塞; 脳血流; 機能回復

1)われわれ独自の小泉-Longa変法により、常に安定した脳梗塞モデルラットを作製することができた。2)hematoxylin-eosin(HE)染色により胎生10.5日ラット中脳胞部神経板組織は、脳梗塞という病的環境下においても移植後2ヶ月以上にわたって生着し続けることが確認された。3)移植片の中には、ドナー由来を示唆するtyrosine hydroxylase陽性細胞が多数確認された。さらに、glial fibrially acidic protein陽性細胞やneurofilament-68陽性細胞、そしてdopamine- and adenosine3',5'-monophosphate-regulated phosphoprotein32陽性細胞も観察された。ただし、これらがドナー由来のものであるかは、今後ドナーをDiI(1,1'-dioctadecyl-3,3,3',3'-tetramethylindocarbocyanine perchlorate)等でマーキングすることによって明らかにしたいと考えている。4)HE染色により移植片内およびその周囲には多数の血管新生が確認された。またMicrofil(血管内注入色素)により移植片の周囲に拡張した血管が蛇行しながら移植片を取り巻くように走行している像が確認された。移植片内部には細い血管が多数観察された。5)移植後の機能評価としてwater-maze法と、treadmill task、tail testを行い、その全ての検査において移植群はvehicle群(DMEMのみ注入)と比較して有意に改善傾向が認められた。来年度においては、放射線同位元素(^<14>C)を用いたオートラジオグラフイー法により、移植片とその周囲の血流量を定量する。また、移植片の長期にわたる生存を確認したいと考えている。

1) It is necessary to establish a stable and stable system for the control of small and medium-sized enterprises 2)Hematoxylin-eosin(HE) staining was used to confirm the development of fetal tissue at 10.5 days after transplantation. 3)Most of the tyrosine hydroxylase-positive cells were identified as the origin of the graft. In addition, glial fibrillary acidic protein positive cells, neurofilament-68 positive cells, dopamine- and adenosine 3',5'-monophosphate-regulated phosphoprotein32 positive cells were observed. DiI(1,1'-dioctadecyl-3,3,3', 3'-tetramethylindocyanine perchlorate), etc. 4)HE staining was used to confirm most of the angiogenesis in the graft. Microfil(Intravascular Pigment Injection) is used to confirm the circumference of the graft, the blood vessel and the graft. Most of the fine blood vessels inside the graft were observed. 5)Functional evaluation after transplantation: water-maze method, treadmill task, tail test, and overall examination of transplanted vehicle population (DMEM injection). In the future, the radiation and radioactivity of the graft will be quantified by the method of quantitative analysis<14>. The long-term survival of the graft was confirmed.

项目成果

福永 篤志、他: "中枢神経系および脳を標的とした再生医療の役割"BIO INDUSTRY. 17(2). 17-25 (2000)

Atsushi Fukunaga 等人：“针对中枢神经系统和大脑的再生医学的作用”BIO INDUSTRY 17(2) 17-25 (2000)。

内田 耕一、他: "神経幹細胞の生物学的特徴とその治療への応用"脳神経外科. 27(9). 787-797 (1999)

Koichi Uchida 等人：“神经干细胞的生物学特性及其治疗应用”，神经外科杂志 27(9)。