歯周病原因子のヒト歯肉上皮細胞活性化機構に関する分子細胞生物学的研究

牙周致病因子激活人牙龈上皮细胞机制的分子细胞生物学研究

• 批准号: 11771130
• 负责人: 楠本 豊
• 金额: $ 1.47万
• 依托单位: Asahi University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 2000
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-11771130/
• 关键词: 歯周病; ヒト歯肉上皮細胞; 歯周病原性細菌; 菌体表層成分

ヒト歯肉上皮細胞の単離,培養を行うとともに,同細胞へpapilloma virus E6/E7 geneを遺伝子導入することにより長期継代培養可能な細胞を樹立した.これら細胞は,上皮細胞の選択培地中で立方形の形態を示し敷石状に増殖した.同細胞は,増殖すると接触阻止がおこり形態変化が観察される.また,免疫染色により細胞内にkeratinを保有していた.このように樹立した細胞は,上皮細胞の形質を保持した長期継代培養可能な細胞である.歯周病原性細菌としてPorphyromonas gingivalis(Pg),Treponema denticola(Td)およびTreponema medium(Tm)を選び,これら細菌より超音波破砕画分(SE)を調製した.Pgからは線毛蛋白,リポ多糖体(LPS)を抽出,精製した.樹立した上皮細胞にPgSEを添加し培養すると,その上清中にInterleukin(IL)-8の明確な産生誘導がみられた.また,同菌LPSと培養すると,その上清中に明確なIL-8産生がみられた.一方,Escherichia coliならびにHelicobacter pylori由来LPSを添加して調べたかぎりでは,同活性はみられなかった.Pg線毛蛋白にはIL-8産生誘導活性がみられた.Td SEおよびTmSEともに同細胞からのIL-8産生誘導がみられた.同様の結果は,simian virus40 T antigen geneを導入したヒト歯肉上皮細胞でも得られた.これらの結果は,歯周病原性細菌の菌体表層成分がヒト歯肉上皮細胞を活性化することを示唆するものと考える.

In vitro culture of human papillary epithelial cells, papillary virus E6/E7 gene was introduced into the same cells. The cuboidal morphology of the epithelial cells in the culture medium was shown as stone-like growth. The same cell, proliferation and contact prevent morphological changes. Immunostaining for cytokeratin was carried out. The cells were cultured for a long time. Periodical pathogenic bacteria such as Porphyromonas gingivalis(Pg),Treponema denticola(Td) and Treponema medium(Tm) are selected and modulated by ultrasonic wave.Pg is extracted and purified from pilin and LPS. PgSE was added to the culture medium of cultured epithelial cells, and Interleukin(IL)-8 was specifically induced in the supernatant. IL-8 production was clearly detected in the supernatant of LPS culture. In one case,Escherichia coli was induced by LPS, and IL-8 production was induced by TdSE, and IL-8 production was induced by LPS. In the same way, the simian virus40 T antigen gene was introduced into the epithelial cells of the human body. As a result, the surface components of pathogenic bacteria around the teeth were activated by epithelial cells of the teeth.

项目成果

Shimauchi,H.: "An autoregulatong effect of interleukin(IL)-10 on proinflammatory ayfokins procheition from porphyromanas gingivolis lipopalysachaicle torelant rurymuomutes"Infect,Immun. 67・5. 2153-2159 (1999)

Shimauchi, H.：“白细胞介素 (IL)-10 对牙龈卟啉单胞菌 lipopalysachaicle torelant rurymuomutes 的促炎 ayfokins 的自动调节作用”，Infect，Immun 67·5（1999）。

Kusumoto,T.: "Oral spirochetal species detection using a polymeras chain rention"Dentistng in Japan. 35. 20-24 (1999)

Kusumoto,T.：“使用聚合酶链张力检测口腔螺旋体物种”日本牙科。