舌下免疫で誘導される制御性T細胞の組織間移動によるI型アレルギー抑制機序の解明

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アレルゲンの腹腔内投与、ならびに皮膚感作を用い、I型アレルギー反応を誘導したマウスで、長期生存型IgE産生細胞の体内分布の検出系の確立を行った。当初は、蛍光色素標識抗IgE抗体による染色で検出を試みた。Fcε受容体を持つ細胞群をgate out並びに酸処理で除外することを試みたが、十分に排除できないことから、特異抗体を用いた染色による長期生存型IgE産生細胞の検出は断念した。そこで、京都大学医学研究科皮膚科学教室、椛島賢治先生よりIgE reporter mouse (IgE/Venus)を分与頂き、IgE産生細胞の検出を再度試みた。まず、確実にIgEを誘導できる感作方法、すなわちアレルゲン（卵白アルブミン：OVA)をアジュバント（アラム）と共に同マウスの腹腔内に投与することでマウス体内におけるIgE産生細胞の検出を試みた。1回投与では検出できなかったが週1回、3回投与で脾臓と骨髄にIgE産生細胞を検出した。アジュバントと共にアレルゲンを腹腔内投与することは現実に即さず、あまりに人為的な実験系である事が指摘される。そこで、より実際に即した経皮感作を行った。テープストリッピング法を用いて、アレルゲンとしてOVAを剃毛した腹部皮膚に塗布した。週3回、4週間塗布では、IgE産生細胞は検出できなかったが、15週間塗布し続けると脾臓、骨髄でIgE産生細胞を検出できた。さらに、これが長期生存型IgE産生細胞か否かを検討する為、週3回、15週連続投与の後9週間非投与期間を経て、検出したところ、骨髄、脾臓でIgE産生細胞が検出出来、既報の情報からこの細胞は長期生存型IgE産生細胞と判断している。検出細胞数が非常に少なく、条件検討が必要であるが、舌下粘膜で誘導される制御性T細胞のターゲットなる細胞の誘導系がほぼ確立できた。